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制備過程中堿液的濃度對氧化鐵納米粒的性能影響較大,堿液濃度低則磁性材料的磁化強度就低;堿液的滴加速度影響磁性材料的性能,滴速越慢,則磁性材料的粒度越小,磁化強度越低;體系的反應(yīng)溫度也有影響,溫度則粒度變大,磁化強度增強。
通過上述方法獲得的磁性納米材料,用水適當(dāng)稀釋后,可攝制電鏡照片,經(jīng)圖象分析儀測定粒度的大小與分布,或用激光粒度測定儀直接測定,可以獲得大小不等的納米材料,小可獲得平均粒度為幾個納米的磁性材料,粒度一般呈正態(tài)分布。還可用X衍射測定儀分析磁性納米材料的結(jié)構(gòu),用磁強計測定其磁化強度。
IMM與細胞的結(jié)合可以采取兩種方法,直接法和間接法。直接法是指接連在磁性微球上,然后與結(jié)合。間接法是指先將細胞與特異混合培養(yǎng),使特異結(jié)合在細胞表面,然后加入預(yù)先用抗鼠IgG(二抗)處理的磁性微球。使磁性微球間接地與結(jié)合。直接法可以減少洗滌和培養(yǎng)步驟,但對IgM單抗很少能使用。間接法與直接法相比,
除適當(dāng)范圍廣外,還可以使用一組單,因而會獲得更好的細胞清除效果。但要經(jīng)過多次的洗滌步驟,特異性也會有所降低。
核酸結(jié)合到磁珠上主要依靠靜電作用、疏水作用和氫鍵作用。細胞或組織在裂解液作用下釋放DNA/RNA,此時經(jīng)過表面修飾的超順磁性納米磁珠即與核酸進行“特異性結(jié)合”形成“核酸-磁珠復(fù)合物”,復(fù)合物可在外加磁場的作用下被分離,后經(jīng)過洗脫液洗去非特異性吸附的雜質(zhì)、去鹽、純化后,可得到欲提取的核酸物質(zhì)。隨著基因檢測、個性化給藥、產(chǎn)前診斷等技術(shù)的快速發(fā)展,生物界各領(lǐng)域都以追求自動化、高通量為訴求,在此背景下磁珠法提取DNA要比傳統(tǒng)方法(Chelex100 法、有機法、二氧化硅法、鹽析法等)更為簡便快捷、安全環(huán)保,并且磁珠與核酸進行特異性結(jié)合提取得到的產(chǎn)物純度和濃度都更高。