熒光微球作為一類特殊的功能微球, 以其穩(wěn)定的形態(tài)結(jié)構(gòu)、窄的粒徑分布、好的單分散性和的發(fā)光效率,吸引了國內(nèi)外研究者廣泛的關(guān)注,且在許多領(lǐng)域尤其是生物醫(yī)學(xué)領(lǐng)域有很重要的應(yīng)用。但是就其發(fā)展情況來看, 還是遠遠不夠的。尤其是在我國,目前應(yīng)用的熒光微球基本上依賴進口,因此,如能使熒光微球國產(chǎn)化,將對我國生物醫(yī)學(xué)等領(lǐng)域的發(fā)展具有重要的意義。本文主要對熒光微球的定義、分類、制備技術(shù)及其應(yīng)用進行了綜述, 并對熒光微球的研究及應(yīng)用前景進行了展望。

不規(guī)則的多分散磁性微球為什么也適合進行核酸提取呢？

原因是實驗過程中磁性微球的量是處于過飽和狀態(tài)，始終能夠保證有足夠的磁性微球?qū)怂徇M行吸附。

也就是說在每一個樣本中加入的磁性微球是遠遠過量的，即使添加磁性微球的量因多分散的原因而存在一定的差別，對于核酸提取的重復(fù)性也不會有明顯的影響。

如今即使我們采用的微球是單分散的，也需要加入遠遠過量的磁性微球進行提取，以此來適應(yīng)大部分樣本（個別樣本核酸含量可能遠遠大于平均水平）。

將包被有的微球噴在膜上干燥之后，如何保證其被樣本潤濕后可以在膜上保持很好的流動性？

流動性差的原因可能是微球的粒徑太大，或者是微球凝集在一起無法流動，亦或是由于樣品中的液體太少導(dǎo)致不能使所有的微球被完全釋放。

我們可以通過下面的方法來測試微球在膜上面的流動性：

1. 在膜上面點一些微球；

2. 在微球完全干燥之前加入一些水或緩沖液使微球在膜動；

3. 如果不能夠流動，那么微球在這個膜上面存在物理上的運動障礙。

建議：對膜進行預(yù)處理可以有效的避免膜對的吸附；另外，也可以在膜上添加一些非常親水的物質(zhì)如蔗糖，可以快速的再水化使微球釋放完全，海藻糖等低聚糖也可以起到很好的效果。

蛋白質(zhì)可通過多種方式共價交聯(lián)到微球表面。微球表面含有環(huán)氧基、氯、醛基、羧基等基團，都可以和的Fc端的氨基反應(yīng)，形成共價鍵。當(dāng)選擇共價交聯(lián)方式的時候，往往需要考慮交聯(lián)的效期、工藝復(fù)雜程度和后的帶電狀況。

種基團可以直接與蛋白的氨基反應(yīng)，形成共價鍵，使用起來較方便，但儲存穩(wěn)定性較之羧基微球稍差。而羧基微球則需經(jīng)過EDC/NHS活化之后，才與蛋白的氨基反應(yīng)，形成共價鍵。由于羧基微球本身不具有直接和蛋白質(zhì)反應(yīng)的性能，因此具有較強的化學(xué)穩(wěn)定性。兩種方法各有優(yōu)缺，在選擇的時候，需根據(jù)本身的情況進行選擇。