RCCS?的原理和優(yōu)勢

     相比動態(tài)和靜態(tài)組織培養(yǎng)系統(tǒng)，RCCS的主要優(yōu)勢是其能提供理想的環(huán)境，從而允許細(xì)胞聚集、3維生長和分化。這個優(yōu)勢使得我們的培養(yǎng)環(huán)境非常接近于體內(nèi)。

在大多數(shù)的動態(tài)培養(yǎng)系統(tǒng)中細(xì)胞/組織會受損，這主要是其與推進(jìn)器接觸而致。那么它為何會與推進(jìn)器接觸呢？因為懸浮，那懸浮是如何產(chǎn)生的？這歸因于以下2個力：

1.受到推進(jìn)器產(chǎn)生的力；

2.在培養(yǎng)的氧交換和懸浮過程中噴出的氣泡所產(chǎn)生的 剪切力。

     在靜態(tài)的平面培養(yǎng)瓶/培養(yǎng)皿中，2維的環(huán)境和塑料基質(zhì)會改變基因表達(dá)和阻止分化。 相比之下，在RCCS?中生長的細(xì)胞/組織因隨機(jī)變化的重力矢量而懸浮，從而在培養(yǎng)液中成連續(xù)的自由落體狀態(tài)。一個較好的比喻是：細(xì)胞從無限高的充滿液體的管中落下。組織在培養(yǎng)液中會落下、翻滾和混合，受不到任何主宰生長方向的單個重力矢量的影響；組織會向各個方向生長。這就是RCCS?的機(jī)制。

     由于系統(tǒng)無推進(jìn)器、空氣升液器、氣泡或攪拌器，使破壞性應(yīng)力減到1小。因維持在一個理想的流體軌道中，故細(xì)胞能共同生長、互相交流和形成3維的結(jié)構(gòu)。

此外，RCCS?是目前唯1的能使研究者進(jìn)行共同培養(yǎng)，而這種培養(yǎng)能提供本能的分化、高細(xì)胞增殖、低的細(xì)胞率和增加細(xì)胞產(chǎn)物的分泌。

RCCS-3D三維細(xì)胞培養(yǎng)中原代細(xì)胞的分離方法？

       凡是來源于胚胎、組織器1官及外周血，經(jīng)特殊分離方法制備而來的原初培養(yǎng)的細(xì)胞稱之為原代細(xì)胞。1懸浮細(xì)胞的分離方法組織材料若來自血液、羊水、胸水或的懸液材料，簡單的方法是采用1000r/min的低速離心10分鐘。經(jīng)離心后由于各種細(xì)胞的比重不同可在分層液中形成不同層，這樣可根據(jù)需要收獲目的細(xì)胞。2實體組織材料的分離方法對于實體組織材料，由于細(xì)胞間結(jié)合緊密，為了使組織中的細(xì)胞充分分散，形成細(xì)胞懸液，可采用機(jī)械分散法（物理裂解）和消化分離法。

RCCS-3D系統(tǒng)中細(xì)胞分化和3D結(jié)構(gòu)

       RCCS-3D具有的低剪切力可以促進(jìn)細(xì)胞緊密附著，促進(jìn)細(xì)胞間聯(lián)系，通過特異性的細(xì)胞粘附分子促進(jìn)細(xì)胞分化，保持高密度細(xì)胞培養(yǎng)的能力；可以直接影響基因表達(dá)，或者間接促進(jìn)細(xì)胞間信號的旁分泌自主分泌。這一過程可使聚集不被剪切力破壞而快速建立和增大。模擬微重力環(huán)境可以促進(jìn)從多種正常的和轉(zhuǎn)化細(xì)胞構(gòu)建肉眼可見的、分化的、組織樣3D 結(jié)構(gòu)（即組織等同物或類器X官），研究范圍包括病毒、人腫X瘤細(xì)胞和其它生物制品（如抗X體、抗原）。