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發(fā)布時(shí)間:2021-05-03 07:55  






廣州碩譜生物科技有限公司,SPE小柱,是目前國(guó)內(nèi)生產(chǎn)SPE小柱較好的生產(chǎn)廠家。正相SPE柱規(guī)格

常用極性固定相包括:硅膠、氧化鋁、弗羅里硅土和含有氰基(CN)、氨基(NH2)、二醇基(2 OH)的粘接硅膠。

正相態(tài)時(shí),溶液體系的極性應(yīng)按樣品溶劑、淋洗溶劑、洗脫溶劑的順序遞增,洗脫強(qiáng)度也隨之遞增。要確保所選的樣本溶劑不會(huì)洗脫目標(biāo)物,所選的淋洗液應(yīng)在不洗脫目標(biāo)物的前提下,很大限1度地洗脫干擾物,這樣洗脫目標(biāo)物才能碰巧完全洗脫目標(biāo)物。

因此,面對(duì)反相、正相固相萃取,在實(shí)際應(yīng)用中應(yīng)選擇哪一種?鑒于大部分化合物都具有多種功能基團(tuán),在實(shí)際操作中,主要根據(jù)目標(biāo)物和干擾物的性質(zhì)考慮采用何種萃取機(jī)理。

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負(fù)離子交換填充物(SAX, MAX)

·分析物:陰離子(酸)化合物

·方法:

(a)活化:樣品在非極性有機(jī)溶1劑中作活化處理時(shí),可用樣品溶劑:在極性溶劑中作樣品處理時(shí),可用水溶性有機(jī)溶1劑作活化處理,然后用水平衡,然后用合適 pH值的緩沖液平衡。

上樣:樣品溶液的 pH值應(yīng)大于其 pKa的兩個(gè)單位(以保證其電荷)。

洗脫液 pH值:洗脫液 pKa小于兩個(gè)單位(中和分析物的電荷)。




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1.在全球市場(chǎng)上,2018年全球色譜柱產(chǎn)量為3785.7千根,比2013年的3096.5千根有所增加,由美國(guó)主導(dǎo),占全球色譜柱產(chǎn)量的45.90%。作為第二大區(qū)域市場(chǎng)的歐洲,占全球產(chǎn)量的24.23%?,F(xiàn)在主要的色譜柱生產(chǎn)商集中在安捷倫公司,沃特世公司,島津公司,世1界領(lǐng)1先的 ThermoFisher公司,它在2018年的市場(chǎng)占有率為22.01%,位居di一。

2.美國(guó)是色譜柱消費(fèi)zui多的地區(qū),2018年1448.7千根色譜柱的消費(fèi)量占全球的38.27%,其次是歐洲的29.78%。

三、色譜柱可分為氣相色譜柱、液相色譜柱和 SPE固相萃取小柱,在全球范圍內(nèi),液相色譜柱的產(chǎn)量占很大比例,2018年為2494千根,占65.88%。其中,氣相色譜柱的產(chǎn)量占24.74%, SPE固相萃取柱的產(chǎn)量占9.38%。

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SPE檢測(cè)方法獨(dú)立于分析方法, SPE檢測(cè)方法僅供后續(xù)分析使用。二、為了使樣品溶液與填料充分接觸,溶劑流量不得過(guò)大。三、可以用自動(dòng)化儀器來(lái)完成。該儀器主要由柱架、柱塞泵、貯液槽、管道和處理樣品的處理機(jī)組成。預(yù)柱處理目的:1.去除可能存在于填料中的雜質(zhì);2.使填料溶出,提高固相萃取的可再生性

建立 SPE方法1.為了防止分析物損失,樣品中的溶劑濃度不宜過(guò)高;2.采用反相萃取法,樣品用水或緩沖劑作溶劑,其中有機(jī)溶1劑含量不超過(guò)10%;3.為克服加樣過(guò)程中分析物損失的問(wèn)題,可采用弱溶劑稀釋樣品,減少樣品體積,增加 SPE柱中的填料,并選擇對(duì)分析物保留較強(qiáng)的吸附劑等措施。



SPE小柱相極固定比流動(dòng)相極性大的分離模式稱為正相模式。主要用途:

固相萃取材料極性表面與物極性官能團(tuán)極性相互作用;極性力比非極性力強(qiáng),但比離子力弱;常用的極性基團(tuán)有羥基,胺基,巰基等。弱極化基質(zhì)環(huán)境有利于形成極性力,因?yàn)槿鯓O化溶劑不能與極性固定相形成氫鍵功能團(tuán)。結(jié)果表明: SPE正相萃取后,樣品基質(zhì)多為弱極性,如正己烷、二氯甲i烷、菜油等,而目標(biāo)物多含有極性官能團(tuán)。常用極性固定相包括:硅膠、氧化鋁、弗羅里硅土和含有氰基(CN)、氨基(NH2)、二醇基(2 OH)的粘接硅膠。

GP-C18通用反相色譜柱特點(diǎn):

利用高可控性的單分子層形成技術(shù)和封尾技術(shù)

*柱間重現(xiàn)率高

*選擇性和分離效i率高

適宜于分離酸性i、中性和堿性化合物,以及多種藥i物和多肽等

建議使用有i機(jī)溶劑或有i機(jī)溶劑/水系統(tǒng)的流動(dòng)相。



(在使用這些清潔溶劑之前,可與柱子供應(yīng)商協(xié)商,以確保它們不會(huì)對(duì)填料造成損害。硅樹脂基質(zhì)中的柱狀物一般都可以用,但是某些洗滌溶劑的配方可能導(dǎo)致有機(jī)聚合物基質(zhì)的填充物膨脹或收縮,從而影響其色譜特性。)此外,確保上表所用的清潔溶劑與以前使用的溶劑可互溶,丙i醇可作為良好的過(guò)渡。每一個(gè)溶劑系統(tǒng)至少要沖洗20個(gè)液柱體積。因?yàn)槟承┤軇┫到y(tǒng)粘度較大,應(yīng)相應(yīng)調(diào)整沖洗流速,以確保不超過(guò)泵的壓力。在用完胍或脲等溶劑清洗過(guò)的柱子上,至少要用40~50柱體積的 HPLC級(jí)純水進(jìn)行沖洗。對(duì)反相柱來(lái)說(shuō),不推薦使用十二烷基磺酸鈉(SDS)和 Trition等表面活性劑,因?yàn)檫@些化合物一定會(huì)牢固地吸附到硅膠結(jié)合相柱上,因此難以去除。使用表面活性劑可以改變填料的表面性能。但是, SeparationGroup的研究表明:多肽合成過(guò)程中產(chǎn)生的保護(hù)基和清除劑對(duì)柱體的污染,可通過(guò)向流動(dòng)相中加入500μ L1% SDS溶液,以1 ml/min的速度清除。以5%~95% EBN/1%(v/v)的三i氟乙i酸梯度洗脫后,在平衡起始條件下,柱體的多肽分離功能得以恢復(fù)。

在反相-固相萃取模式中,溶劑體系的極性應(yīng)按樣品溶劑、淋洗溶劑、洗脫溶劑的順序遞減,而溶劑體系的洗脫強(qiáng)度應(yīng)逐漸增加。要確保所選的樣本溶劑不會(huì)洗脫目標(biāo)化合物,所選的淋洗劑應(yīng)在不洗脫目標(biāo)化合物的前提下,zui大限度地洗脫干擾物,所選的洗脫劑應(yīng)能恰巧完全洗脫目標(biāo)化合物。在許多固相萃取材料的極性表面和樣品中目標(biāo)化合物的極性官能團(tuán)之間會(huì)產(chǎn)生極性力。通常使用極性力的吸附劑在色譜中被稱為正相色譜吸附劑。極性力比非極性力更強(qiáng),但比離子力更弱。常用的極性基團(tuán)有羥基,胺基,巰基等。




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