ELISA的基礎(chǔ)是抗原或的固相化及抗原或的酶標記。結(jié)合在固相載體表面的抗原或仍保持其學活性，酶標記的抗原或既保留其學活性，又保留酶的活性。在測定時，受檢標本（測定其中的或抗原）與固相載體表面的抗原或起反應(yīng)。用洗滌的方法使固相載體上形成的抗原復合物與液體中的其他物質(zhì)分開。蘇州夢犀生物科技有限公司蘇州夢犀生物科技有限公司


器材（1）　聚塑料板（簡稱酶標板）40孔或96孔，ELISA檢測儀，50μl及100μl加樣器，塑料滴頭，小毛巾，洗滌瓶。（2）　小燒杯、玻璃棒、試管、吸管和量筒等。（3）　4℃冰箱，37℃孵育箱。試驗原理試劑盒是固相夾心法酶聯(lián)吸附實驗（ELISA）.已知濃度的標準品、未知濃度的樣品加入微孔酶標板內(nèi)進行檢測。先將生物素標記的同時溫育。洗滌后，加入親和素標記過的HRP。再經(jīng)過溫育和洗滌，去除未結(jié)合的酶結(jié)合物，然后加入底物A、B，和酶結(jié)合物同時作用。產(chǎn)生顏色。顏色的深淺和樣品中的濃度呈比例關(guān)系。


安全性1． 避免直接接觸終止液和底物A、B。一旦接觸到這些液體，請盡快用水沖洗。2． 實驗中不要吃喝、抽煙或使用化妝品。3． 不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份。4． 試劑應(yīng)按標簽說明書儲存，使用前恢復到室溫。稀稀過后的標準品應(yīng)丟棄，不可保存。5． 實驗中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中，密封保存，以免變質(zhì)。6． 不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。

操作步驟1. 從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條，剩余板條用自封袋密封放回4℃。

2. 設(shè)置標準品孔和樣本孔，標準品孔各加不同濃度的標準品50μL；

3. 樣本孔中加入待測樣本50μL；空白孔不加。

4. 除空白孔外，標準品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶（HRP）標記的檢測100μL，用封板膜封住反應(yīng)孔，37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。

5. 棄去液體，吸水紙上拍干，每孔加滿洗滌液（350μL），靜置1min，甩去洗滌液，吸水紙上拍干，如此重復洗板5次（也可用洗板）。

6. 每孔加入底物A、B各50μL，37℃避光孵育15min。

7. 每孔加入終止液50μL，15min內(nèi)，在450nm波長處測定各孔的OD值。