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ELISA試劑盒的測定原理
測定技術的基礎在于抗原之間的特異結合反應,所以任何的診斷劑離不開好的原料,如抗原,酶等。以前用于測定的抗原通常為各種純化抗原,而則為純化抗原動物后獲得的多和使用雜交瘤技術得到的,而抗原或的標記物如酶標結合物則通過各種化學合成方法制備。近年來,隨著分子生物學的發(fā)展,使用基因工程方法制備各種特殊的抗原或及其酶結合物等測定試劑幾成為現實的新一代試劑,各種新型使用的測定方法也不斷出現。
ELISA試劑盒——ELISA實驗通用規(guī)則
1、溫浴時,要用不干膠或膠帶紙封好酶標板,防止水分的蒸發(fā)。
Elisa試劑盒的操作注意事項
洗刷是ELISA試劑盒操作過程中決議實驗勝敗的一個關鍵步驟。目的是除掉未結合的反響物,間斷抗原抗體反響,除掉標本中與反響無關的成分、游離的酶標物以及反響過程中吸附于固相載體上的非特異性物質。
斷定效果須運用Elisa試劑盒測讀儀,比色法判讀可選擇單波長或雙波長,根據反響液顏色的不同選用不同波長的濾光片,以空白孔校零測定反響孔的吸光度值。具有杰出的重復性。
Elisa試劑盒操作注意事項
1.Elisa試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標包被板開封后如未用完,板條應裝入密封袋中保存。
2.濃洗滌液可能會有結晶析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶,洗滌時不影響結果。
3.各步加樣均應使用加樣器,并經常校對其準確性,以避免試驗誤差。一次加樣時間控制在5分鐘內,如標本數量多,推薦使用排槍加樣。
4.請每次測定的同時做標準曲線,做復孔。如標本中待測物質含量過高(樣本OD值大于標準品孔*孔的OD值),請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(n倍)后再測定,計算時請zui后乘以總稀釋倍數(×n×5)。
5.封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。
6.底物請避光保存。
7.嚴格按照說明書的操作進行,試驗結果判定必須以讀數為準.
8.所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應按污染物處理。
9.本試劑不同批號組分不得混用。
10. 如與英文說明書有異,以英文說明書為準。