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試樣瓶材選用試樣瓶的玻璃材料一般分為低硼與中性,不同之處是硼硅含量不同,玻璃的理化性質(zhì)也不同,我司可以提供兩種材料的樣品瓶,對于高通量實(shí)驗(yàn)室,低硼硅玻璃是很好的選擇。管內(nèi)管道適合于樣品進(jìn)樣檢測實(shí)驗(yàn),錐底內(nèi)插管比平底插管殘留少。組合式支架對進(jìn)樣針有保護(hù)作用,為進(jìn)樣提高液位。本品瓶裝是根據(jù)美國藥典和歐洲藥典的標(biāo)準(zhǔn)制造的,可以減少你實(shí)驗(yàn)的消耗量,節(jié)省時(shí)間。本系列產(chǎn)品減少了因隔板移動(dòng)、針尖損傷、移位等造成的分析誤差,大大避免了分析中的錯(cuò)誤,實(shí)現(xiàn)了樣品再利用。
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樣本瓶雖小,但學(xué)問卻很大。每當(dāng)我們的實(shí)驗(yàn)結(jié)果出了問題,我們總是才想到樣品瓶,但這也是我們要首先考慮的事情。當(dāng)你選擇合適的樣品瓶時(shí),你需要做三個(gè)決定:隔板、蓋子和樣品瓶本身。01、隔板選擇指南PTFE·推薦用于一次進(jìn)樣的耐溶劑性和化學(xué)兼容性·刺穿后不再密封·不推薦進(jìn)行長期的樣品存儲(chǔ)聚乙烯/硅膠·推薦多個(gè)進(jìn)樣和樣品儲(chǔ)存·具有優(yōu)良的再密封特性采用 PTFE在刺穿前耐化學(xué)腐蝕,刺穿后隔板與硅膠有化學(xué)兼容性·操作溫度范圍從-40℃到200℃預(yù)先切割 PTFE/硅膠·提供良好的通風(fēng),以防止樣品瓶中形成真空,從而實(shí)現(xiàn)的取樣重復(fù)性·取樣后底端針堵塞優(yōu)良的再密封能力·推薦用于多次進(jìn)樣·操作溫度范圍從-40℃到200℃無隔板 PE·有與 PTFE相同的優(yōu)點(diǎn)。
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不計(jì)空白梯度洗脫…為保證良好的重復(fù)性,梯度洗脫的溶劑純度要求較高。由于弱溶劑中的雜質(zhì)在色譜柱上被強(qiáng)溶劑洗脫,在分析樣品之前,必須對樣品進(jìn)行空白梯度洗脫,識(shí)別溶劑雜質(zhì)峰。分級洗脫溶劑需要完全脫氣,以防止在混合過程中產(chǎn)生氣泡。沒有注意到溶劑混合引起的粘度變化…由于混合溶劑的粘度隨組分而變化,因此,在梯度洗脫過程中常常會(huì)發(fā)生壓力變化。比如,和水的粘度都比較小,當(dāng)它們以相似比例混合時(shí),粘度增加很大,這時(shí)的柱壓比或水為流動(dòng)相時(shí)大一倍。所以在梯度洗脫時(shí)要注意防止壓力超過輸液泵或色譜柱可以承受的大壓力。
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六通閥的正確使用與維修:①樣品進(jìn)樣前,要用0.45μ的濾膜過濾,以減少微粒對進(jìn)樣閥的磨損。②旋轉(zhuǎn)閥芯時(shí)不要太慢,不要停留在中間位置,否則流動(dòng)相受阻,使泵內(nèi)壓力急劇上升,甚至超過了泵的大壓力;再轉(zhuǎn)到進(jìn)樣位置,過高的壓力會(huì)使柱頭損壞。③為了防止進(jìn)樣閥內(nèi)的緩沖鹽及樣品殘留,每次分析結(jié)束后應(yīng)沖洗進(jìn)樣閥。一般可采用清水沖洗,或先用溶樣溶劑沖洗,再用清水沖洗。色譜柱的使用與維護(hù)色譜柱的正確使用與維護(hù)非常重要,一不小心就會(huì)降低柱效,縮短使用壽命,甚至損壞。為了維護(hù)色譜柱,在進(jìn)行色譜分析時(shí),必須注意以下問題。
HPLC (HPLC)作為一種、快速的分析分離技術(shù),在上個(gè)世紀(jì)70年代得到迅速發(fā)展,是現(xiàn)代分離檢測的重要手段。層析法的分離原理是:當(dāng)溶解于流動(dòng)相(mobile phase)的各組分通過固定相(station phase)發(fā)生作用(吸附、分配、排阻、親和),其大小、強(qiáng)弱不同,在固定相中的滯留時(shí)間也不同,從而先后從固定相中流出。也叫色層法,色譜法。
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HPLC法適用范圍很廣,樣品適用范圍廣,不受分析對象的揮發(fā)性和熱穩(wěn)定性的限制,幾乎所有化合物都包括高沸點(diǎn)、極性、離子型及大分子等,都可以用 HPLC分析測定,從而彌補(bǔ)了氣相色譜法的不足。現(xiàn)有已知有機(jī)化合物中20%左右可用的氣相色譜分析方法,而80%需要 HPLC分析。液相色譜由于其分離、分析速度快、檢測靈敏度高、可分析分離高沸點(diǎn)、不氣化、熱不穩(wěn)定等生理活性物質(zhì)等特點(diǎn),已在藥典中得到了廣泛的應(yīng)用,并已在藥典中廣泛應(yīng)用。HPLC分析方法不受溫度和樣品沸點(diǎn)的限制,因而具有廣泛的應(yīng)用前景。HPLC技術(shù)經(jīng)過30多年的快速發(fā)展,在基礎(chǔ)理論、儀器設(shè)備、色譜柱等方面的研究日趨成熟,目前已成為化學(xué)化工、環(huán)境、藥學(xué)、食品等領(lǐng)域具優(yōu)勢的分離分析方法之一。
一些柱效值的測量與計(jì)算方法由于色譜峰是假設(shè)在運(yùn)動(dòng)相中、固定相中樣品濃度為正態(tài)分布而獲得的樣品譜帶分布,所以常將色譜峰型看作正態(tài)曲線來計(jì)算理論塔板數(shù)。所以柱效(以理論塔板數(shù)量 n為單位)的公式習(xí)慣上定義為:在式中 tR為色譜峰的保留時(shí)間;σ2表示測定色譜峰與時(shí)間的偏差; a是與峰高(從測峰寬的基線量起)有關(guān)的常數(shù),而ω b是用時(shí)間表示由色譜峰頂點(diǎn)與色譜峰的基線相交點(diǎn)的切線相交的距離。
假設(shè)某一色譜峰為正態(tài)峰型,則每一種方法均能得到相同的結(jié)果。即便是獲得較為理想的峰型及溶質(zhì),由于柱內(nèi)有溝槽或空隙,也會(huì)產(chǎn)生非正態(tài)峰型。因此不同的計(jì)算方法所得到的 n值相差較大。對于正常模式的偏離,通常用“前延”或“后延”表示。對這些峰型,測峰高度越高,計(jì)算出的理論塔板數(shù)值越大(精度越低)。很多情況下,色譜分析人員需要能夠反映整個(gè)峰型(包括拖尾)的柱效值,同時(shí)為了保證定量的重復(fù)性,還需要有很好的色譜峰對稱。此時(shí)色譜峰不對稱的計(jì)算方法是合適的。僅為了監(jiān)測色譜柱從次使用到壽命結(jié)束過程中的柱效,那么上述任何一種都可以,應(yīng)選擇簡單的方法。