廣州碩譜生物科技有限公司，SPE小柱，是目前國內(nèi)生產(chǎn)SPE小柱較好的生產(chǎn)廠家。活性炭固相萃取柱廠家

反相分離柱C18的適用范圍

C18反相分離柱廣泛應(yīng)用于天然產(chǎn)物的提取，藥1物合成研究與開發(fā)，生物制藥等領(lǐng)域。若樣品極性偏大， Rf值非常接近，則不能分離正相模式；終產(chǎn)物要求純度98%以上，采用正相模式達(dá)不到；樣品在正相條件下存在溶解問題——不妨考慮采用反相C18模式分離。由于其填料粘合技術(shù)的成熟和良好的分離能力，C18柱已成為日常接觸分離提純研究人員zui多的反相柱。

反相式C18反相分離柱的主要參數(shù)

分離柱C18有多種參數(shù)，大致可分為四個方面：相鍵(包括修飾、封端)、填充載體(硅膠純度、填充顆粒類型、粒徑、孔徑)、柱體本身(柱效、柱內(nèi)徑、柱長)和隱藏參數(shù)(比表面積、碳含量等)。小編想選擇以下幾個大家容易忽略的

想了解：SPE小柱等信息，可來電咨詢廣州碩譜生物科技有限公司！活性炭固相萃取柱廠家

反向作用機(jī)制：

反相萃取分離主要是利用固相萃取材料官能團(tuán)與目標(biāo)化合物碳?xì)滏I之間的非極性作用力。反相非極性的 SPE柱通常更適合從極性基質(zhì)中提取分離出非極性和中等極性的目標(biāo)化合物。

對利用非極性作用力吸附于非極性 SPE柱的目標(biāo)化合物，可用氯1仿、環(huán)己1烷、乙1酸乙1酯等具有非極性的溶劑洗脫。當(dāng)溶劑的洗脫強(qiáng)度足夠大，可以使目標(biāo)化合物與吸附劑非極性基團(tuán)間的范德華力不受影響時，使其在 SPE柱中順利洗脫。即使是極性更強(qiáng)的甲1醇，對許多化合物而言，也有足夠的非極性力量來洗脫它。有時候，單種溶劑無法完全洗脫疏水性的目標(biāo)化合物，可以考慮使用二氯甲1烷：乙1酸乙1酯(1:1，體積比)。

在選擇固相萃取機(jī)理時，應(yīng)根據(jù)目標(biāo)化合物和干擾物的性質(zhì)考慮采用哪種萃取機(jī)理，因?yàn)樵S多化合物同時具有多種功能基。例如：2-萘胺是一弱堿性化合物(pKa=4.16)，它在一定 pH條件下也可呈陽離子態(tài)，同時它又具有疏水性和親水性的非極性官能團(tuán)。此時，應(yīng)根據(jù)樣品基質(zhì)的具體情況，選擇有利于從干擾物中分離目標(biāo)化合物的萃取機(jī)理。當(dāng)樣品基質(zhì)中同時含有大量非極性干擾雜質(zhì)時，應(yīng)盡量避免采用非極性萃取機(jī)制，而應(yīng)采用以 pKa以下兩個 pH單位或以 pH=2.16為限的陽離子交換機(jī)制。相反，如果樣品中同時含有大量干擾雜質(zhì)陽離子，則應(yīng)調(diào)整樣品 pH值至6.16 (比 pKa 2單位高)，采用非極性萃取機(jī)制更為有利。

骨架形狀，粒徑，孔徑

硅的基質(zhì)形態(tài)一般可分為非晶態(tài)和球態(tài)。無定型C18材料具有較高的性能價格比，是初步提純的首1選。且C18具有較好的顆粒均一性、較高的柱效和分離性，但相對價格可能稍高，可作為精制的選擇。

現(xiàn)在市場上可供選擇的填料粒徑很多，中低壓備通常是為了增大上樣量，增加流速，減小壓力而選用大粒徑填料；由于可以達(dá)到較高的柱效，因此小粒徑填料更適合高1效液相或高壓制備。在選擇填料時還應(yīng)充分考慮孔徑，分子量小于5000 da時選擇孔徑(80~120 da)，而對于蛋白質(zhì)大分子分子量20000 da左右、分子量大于20000 da的樣品，通常不采用C18分離模式，采用 SEC等模式進(jìn)行分離。

廣州碩譜生物科技有限公司，反相SPE柱，是目前國內(nèi)生產(chǎn)SPE小柱較好的生產(chǎn)廠家?；钚蕴抗滔噍腿≈鶑S家

用溶劑的次序也會影響流動速度，如活化溶劑是二氯甲1烷，平衡溶劑是水，因?yàn)槎燃?烷與水不互溶，活化平衡時間的流動速度較慢。因此，我們建議在兩種非互溶溶劑之間加入過渡溶劑甲1醇，這樣就能解決這個問題。

氣層效應(yīng)

氣層可以阻止液體流動，從而引起流速問題。氣層形成的主要原因是篩板或填料松動。商品產(chǎn)品通過運(yùn)輸?shù)接脩羰种校谶\(yùn)輸過程中，填與篩板之間發(fā)生位移、松動，很容易形成氣層。這個氣氣層有時會更明顯，能看出填充物有斷裂或縫隙。有時候松動并不明顯，使用小柱體時才能感覺到流速的不同。這樣，通過壓實(shí)篩板或使用正負(fù)壓將空氣排出即可解決輕微松動問

想了解：反相SPE柱等信息，可來電咨詢廣州碩譜生物科技有限公司！活性炭固相萃取柱廠家

固相萃取柱能否重復(fù)使用？

回答：理論上說，可以洗干凈后再使重復(fù)使用，因?yàn)樵跊_洗過程中不能保證完全沖洗干凈，其殘留物質(zhì)在下次使用可能會對被測物造成干擾，導(dǎo)致回收率和重現(xiàn)性差！

相同規(guī)格、不同品牌的固相萃取小柱樣做相同樣品為何回收率不同？

答：不同品牌的小柱雖然等效規(guī)格固定也一樣，但其填充源、接合技術(shù)、裝填工藝等因素都會造成樣品回收率的差異！

規(guī)范中規(guī)定某一品牌的固相萃取柱，是否可以用其它同一品牌的固相萃取柱代替？

回答：理論上都可以，但是有些時候所測定的基質(zhì)和物質(zhì)比較復(fù)雜，使用標(biāo)準(zhǔn)推薦的固相萃取小柱可能會獲得更好的回收率和重現(xiàn)性！

反相萃取分離主要是利用固相萃取材料官能團(tuán)與目標(biāo)化合物碳?xì)滏I之間的非極性作用力。反相非極性的 SPE柱通常更適合從極性基質(zhì)中提取分離出非極性和中等極性的目標(biāo)化合物。對利用非極性作用力吸附于非極性 SPE柱的目標(biāo)化合物，可用氯i仿、環(huán)i己烷、乙i酸乙i酯等具有非極性的溶劑洗脫。當(dāng)溶劑的洗脫強(qiáng)度足夠大，可以使目標(biāo)化合物與吸附劑非極性基團(tuán)間的范德華力不受影響時，使其在 SPE柱中順利洗脫。即使是極性更強(qiáng)的甲i醇，對許多化合物而言，也有足夠的非極性力量來洗脫它。有時候，單種溶劑無法完全洗脫疏水性的目標(biāo)化合物，可以考慮使用二氯甲i烷：乙i酸乙i酯(1:1，體積比)。

對典型的硅膠基質(zhì)鍵合反相柱體，在不使用緩沖液的情況下，建議采用下列清洗溶劑系列：甲i醇---乙晴---75%乙晴/25%異丙i醇---異丙i醇---二氯甲i烷---己烷；每種溶劑至少沖洗10個柱體，分析柱的洗滌流速為250 mm×4.6 mm。zui終以10柱體積異丙i醇過渡，然后返回到原始流動相(不含緩沖鹽)，zui后返回到初始流動相配置。如使用紫外檢測器，則應(yīng)避免選擇在紫外區(qū)域有吸收作用的溶劑，否則需要使用大量的溶劑沖洗基線，以使基線穩(wěn)定。四氫呋i喃也是常用的清潔溶劑。如懷疑柱子受到嚴(yán)重污染，也可用二甲亞砜(DMSO)或二甲i基胺與水按50:50的比例混合，用流速低于0.5 ml/min的水沖洗色譜柱。