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等溫核酸試劑盒
TwisAmp basic
主要特點∶
1、快速 DNA檢測
2、單個分子檢測
3、超靈敏
4、多重檢測
5、96次反應(yīng)
產(chǎn)品組成:
1、RPA凍干真空包裝組分(室溫保數(shù)天不會改變活力)
2、TwistAmp 水化buffer
3、醋酸鎂(280mM )
4、對照模板及引物預(yù)混
檢測方法:電冰
產(chǎn)品性質(zhì):
1、經(jīng)優(yōu)化的新配方
2、快速恒溫擴增20分鐘37°℃
3、靈敏度更高
4、96次反應(yīng)/Kit
存貯:
-20°℃保存。
試劑盒使用示例
試劑盒的產(chǎn)生正是為了使實驗人員能夠擺脫繁重的試劑配制及優(yōu)化過程,所以試劑盒中一般配備有相應(yīng)的使用說明書,用戶按照說明書不需或只需少量的優(yōu)化即可得到滿意的結(jié)果。
⑴試劑盒使用說明書
說明書一般包括公司標(biāo)志及名稱、試劑盒名稱、試劑盒組成、保質(zhì)期、使用領(lǐng)域、使用方法等項目
①一般在頁眉頁腳處為公司的名稱及標(biāo)志;
②接下來為試劑盒的名稱;
③試劑盒組成中應(yīng)為試劑盒中的所有內(nèi)容,為了簡潔明了,一般以表格的形式表現(xiàn);
④操作步驟是試劑盒說明書中很重要的部分,內(nèi)容應(yīng)準(zhǔn)確、簡潔、易懂,不能包含帶有歧義的句子,更不能含糊其辭,排版上操作步驟應(yīng)將復(fù)雜的步驟拆解,使人一目了然。
試劑盒
英國TwistDx Inc公司開發(fā)的重組酶聚合酶擴增(Recombinase Polymerase Amplification,RPA)--被稱為是可以替代PCR的核酸檢測技術(shù),目前全球新的等溫擴增檢測技術(shù)。以此為基礎(chǔ)的TwistAmp? 核酸擴增產(chǎn)品,能夠在15分鐘內(nèi)進行常溫下的單分子核酸檢測。該技術(shù)對硬件設(shè)備的要求很低,特別適合用于體外診斷、獸醫(yī)、食品安全、生物防御和農(nóng)業(yè)等領(lǐng)域。常規(guī)PCR必須經(jīng)過變性、退火、延伸三個步驟,而PCR儀本質(zhì)上就是一個控制溫度升降的設(shè)備。RPA反應(yīng)的適宜溫度在37°C - 42°C之間,無需變性,在常溫下即可進行。這無疑能大大加快PCR的速度。此外,由于不需要溫控設(shè)備,RPA可以真正實現(xiàn)便攜式的快速核酸檢測。據(jù)介紹,RPA檢測的靈敏度很高,能夠?qū)⒑哿康暮怂?尤其是DNA)模板擴增到可以檢出的水平,從單個模板分子得到大約1012擴增產(chǎn)物。而且RPA還用不著復(fù)雜的樣品處理,適用于無法提取核酸的實地檢測。RPA不僅可以對擴增產(chǎn)物進行終點檢測,還可以對擴增過程進行實時監(jiān)控,甚至可以通過試紙條(側(cè)流層析試紙條LFD)讀取結(jié)果。
目前,TwistAmp? 試劑盒的擴增子長度在500bp以內(nèi)。不過,經(jīng)過特別優(yōu)化的RPA擴增,也可以生成更長的擴增產(chǎn)物,或者減慢擴增速度(便于定量),甚至在更低的溫度下進行反應(yīng)。
與假陰性相對的是假陽性。這通常是由于樣本被污染或是核酸檢測試劑盒被污染導(dǎo)致的?!叭鄙賴?yán)格控制條件的實驗室環(huán)境、不專業(yè)的檢測操作,以及樣本本身的污染,都會導(dǎo)致假陽性出現(xiàn)。”有人告訴記者,“由于事發(fā)突然,很多地方可能沒有檢測條件,因此需要把樣本送到符合條件的實驗室去,而運輸途中也有污染風(fēng)險?!贝送猓瑱z測試劑盒的探針引物或酶受到污染之后,也會出現(xiàn)假陽性。