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凍存袋技術
是將細胞放在低溫環(huán)境,減少細胞代謝,以便長期儲存的一種技術。細胞凍存是細胞保存的主要方法之一,起到了細胞保種的作用。利用凍存技術將細胞置于-196℃液氮中低溫保存,可以使細胞暫時脫離生長狀態(tài)而將其細胞特性保存起來,這樣在需要的時候再復蘇細胞用于實驗。而且適度地保存一定量的細胞,可以防止因正在培養(yǎng)的細胞被污染或其他意外事件而使細胞丟種,起到了細胞保種的作用。
凍存袋細胞復蘇操作步驟
1.操作人員應戴防護面罩及手套,防止冷凍管可能爆裂之傷害。
2.自液氮或干冰容器中取出冷凍管,檢查蓋子是否旋緊,由于熱脹冷縮過程,此時蓋子易松掉。
3.將新鮮培養(yǎng)基置于37℃水槽中回溫,回溫后噴以70酒精并擦拭之,移入無菌操作臺內。
4.取出冷凍管,立即放入3℃水槽中快速解凍,輕搖冷凍管使其在1分鐘內全部融化,以7O%酒精擦拭保存管外部,移入無菌操作臺內。
5.取出解凍之細胞懸浮液,緩緩加入有培養(yǎng)基之培養(yǎng)容器內(稀釋比例為1:10~1:15),混合均勻,放入培養(yǎng)箱培養(yǎng)。取0.1m1解凍細胞懸浮液作存活測試。
6.解凍后是否立即去除冷凍保護劑,依細胞種類而異,一般而言,大都不需要立即去除冷凍保護劑。惟若要立即去除,則將解凍之細胞懸浮液加入含有5-10m1培養(yǎng)基之離心管內,離心 1000rpm,5分鐘,移去上清液,加入新鮮培養(yǎng)基,混合均勻,放入培養(yǎng)箱培養(yǎng)。
凍存袋介紹
細胞凍存是將細胞放在低溫環(huán)境,減少細胞代謝,以便長期儲存的一種技術。細胞凍存是細胞保存的主要方法之一,起到了細胞保種的作用。連續(xù)培養(yǎng)的細胞系容易發(fā)生遺傳漂變,有限細胞系終會發(fā)生衰老,所有培養(yǎng)的細胞都易受到微生物污染。已建立的細胞系是一種寶貴資源,更換細胞系成本高昂,而且耗費時間。可以利用細胞凍存的形式來購買、寄贈、交換和運送某些細胞。
凍存采血袋的優(yōu)點
采血袋通過連接導管與一三通管相連;所述一三通管的三個孔設置方向為兩個并列相反,一個向下方向,分別連接采血袋;第二三通管和轉移袋;所述第二三通管的三個孔分別連接轉移袋,細胞培養(yǎng)袋和細胞凍存袋;所述采血袋上設置有阻塞件,所述阻塞件由PVC套管和PC折芯組成;所述采血管;一三通管的主管和支管,第二三通管的主管和支管均設有止流夾.本實用新型提供的用于細胞培養(yǎng)的凍存袋從采血到所需成分冷凍保存一步到位減少了成分污染,保障了成分質量要求.