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life 水凝膠中細胞的固定與標記
使用小分子物質,例如熒光標記 phalloidin,核酸染料,活性和毒性檢測試劑,增值檢測試劑等小分子物質進行細胞標記方法,除了在孵育時間上適度延長以便能在水凝膠中充分擴散外,與傳統(tǒng)的 2D 細胞培養(yǎng)方式相同。整個支架是由尺寸均勻的聚合物纖維構成,相鄰層面的纖維90o垂直排列,形成了三維的100%互連的多孔結構。所培養(yǎng)的細胞如果經基因修飾還有熒光蛋白,則可直接用于觀測,因凝膠完全透明不影響觀測結果。如果使用抗l體等大分子對細胞進行標記則不能直接在水凝膠中開展,因水凝膠的孔徑原因,不適合直接抗l體標記,需要使用 dextranase 將細胞從水凝膠中釋放出來,如果擔心細胞在操作過程中細胞生理活動波動,則可經在凝膠中將細胞固定后在進行操作。
如果按支持材料形成的方式分,基于 scaffold 的培養(yǎng)體系可分為如下兩類,一種是將細胞分散在液體水凝膠中,然后通過交聯(lián)實現 3D 培養(yǎng),這類產品代表生產商包括 Cellendes, Matrigel, Glycosan Biosystems 和 QGel 等;另外一種是將細胞「播種“在 3D 基質上,這類方法的代表廠商包括 3D Biotek, Alvetex 和 AlgiMatrix 等。與一般海綿狀多孔支架材料不同,該支架具有100%的開放且相互連通的小孔,因此,細胞培養(yǎng)液可以容易地流通過支架空隙,從而消除了其他多孔支架經常遇到的營養(yǎng)/廢物交換不暢的問題。第l一種方式中的 Cellendes 產品上面已經做了簡要介紹
1. 3D Insert-PS支架培養(yǎng)板
PS,即聚苯l乙烯(Poly Styrene),PS材料經3D Biotek精密微細加工技術制作成標準孔徑的三維支架,然后再將3D Insert-PS支架放入培養(yǎng)板(6/12/24/48/96孔板)中,就是3D Insert-PS支架培養(yǎng)板
3D Insert-PS支架培養(yǎng)板更多產品信息,請見鏈接:3D Insert-PS(聚苯l乙烯3D培養(yǎng)支架培養(yǎng)板)
2.3D Insert-PCL支架培養(yǎng)板
PCL,即聚己內酯(Polycaprolactone),是一種可生物降解的生物材料,PCL材料經3D Biotek精密微細加工技術制作成標準孔徑的三維支架,然后再將3D Insert-PCL支架放入培養(yǎng)板(6/12/24/48/96孔板)中,就是3D Insert-PCL支架培養(yǎng)板
3D Insert-PCL支架培養(yǎng)板更多產品信息,請見鏈接:3D Insert-PCL(聚已內酯3D培養(yǎng)支架培養(yǎng)板)
3D Insert-PS支架培養(yǎng)板和3D Insert-PCL支架培養(yǎng)板的共同點:
1.都是使用3D Biotek精密微細加工技術,保證孔道尺寸均一,且保證批次間一致性高;
2.可用于任何細胞的三維細胞培養(yǎng),目前已成功培養(yǎng)的細胞類型,
3D Insert-PCL/PS三維支架成功培養(yǎng)的細胞類型;
3.都包含3D Insert 6孔培養(yǎng)板,12孔培養(yǎng)板,24孔培養(yǎng)板,48孔培養(yǎng)板和96孔培養(yǎng)板,供您選擇。
3D Insert-PS支架培養(yǎng)板和3D Insert-PCL支架培養(yǎng)板的不同之處,以及該如何選擇哪:
1. 3D Insert-PS支架是透明的,因為可用倒置顯微鏡實時觀測細胞的狀態(tài);而3D Insert-PCL支架是不透明的,因此如果要觀測細胞的狀態(tài),需做切片后觀測。