熒光微球作為一類特殊的功能微球, 以其穩(wěn)定的形態(tài)結(jié)構(gòu)、窄的粒徑分布、好的單分散性和的發(fā)光效率,吸引了國(guó)內(nèi)外研究者廣泛的關(guān)注,且在許多領(lǐng)域尤其是生物醫(yī)學(xué)領(lǐng)域有很重要的應(yīng)用。但是就其發(fā)展情況來(lái)看, 還是遠(yuǎn)遠(yuǎn)不夠的。尤其是在我國(guó),目前應(yīng)用的熒光微球基本上依賴進(jìn)口,因此,如能使熒光微球國(guó)產(chǎn)化,將對(duì)我國(guó)生物醫(yī)學(xué)等領(lǐng)域的發(fā)展具有重要的意義。本文主要對(duì)熒光微球的定義、分類、制備技術(shù)及其應(yīng)用進(jìn)行了綜述, 并對(duì)熒光微球的研究及應(yīng)用前景進(jìn)行了展望。

不規(guī)則的多分散磁性微球?yàn)槭裁匆策m合進(jìn)行核酸提取呢？

原因是實(shí)驗(yàn)過(guò)程中磁性微球的量是處于過(guò)飽和狀態(tài)，始終能夠保證有足夠的磁性微球?qū)怂徇M(jìn)行吸附。

也就是說(shuō)在每一個(gè)樣本中加入的磁性微球是遠(yuǎn)遠(yuǎn)過(guò)量的，即使添加磁性微球的量因多分散的原因而存在一定的差別，對(duì)于核酸提取的重復(fù)性也不會(huì)有明顯的影響。

如今即使我們采用的微球是單分散的，也需要加入遠(yuǎn)遠(yuǎn)過(guò)量的磁性微球進(jìn)行提取，以此來(lái)適應(yīng)大部分樣本（個(gè)別樣本核酸含量可能遠(yuǎn)遠(yuǎn)大于平均水平）。

將包被有的微球噴在膜上干燥之后，如何保證其被樣本潤(rùn)濕后可以在膜上保持很好的流動(dòng)性？

流動(dòng)性差的原因可能是微球的粒徑太大，或者是微球凝集在一起無(wú)法流動(dòng)，亦或是由于樣品中的液體太少導(dǎo)致不能使所有的微球被完全釋放。

我們可以通過(guò)下面的方法來(lái)測(cè)試微球在膜上面的流動(dòng)性：

1. 在膜上面點(diǎn)一些微球；

2. 在微球完全干燥之前加入一些水或緩沖液使微球在膜動(dòng)；

3. 如果不能夠流動(dòng)，那么微球在這個(gè)膜上面存在物理上的運(yùn)動(dòng)障礙。

建議：對(duì)膜進(jìn)行預(yù)處理可以有效的避免膜對(duì)的吸附；另外，也可以在膜上添加一些非常親水的物質(zhì)如蔗糖，可以快速的再水化使微球釋放完全，海藻糖等低聚糖也可以起到很好的效果。

蛋白質(zhì)可通過(guò)多種方式共價(jià)交聯(lián)到微球表面。微球表面含有環(huán)氧基、氯、醛基、羧基等基團(tuán)，都可以和的Fc端的氨基反應(yīng)，形成共價(jià)鍵。當(dāng)選擇共價(jià)交聯(lián)方式的時(shí)候，往往需要考慮交聯(lián)的效期、工藝復(fù)雜程度和后的帶電狀況。

種基團(tuán)可以直接與蛋白的氨基反應(yīng)，形成共價(jià)鍵，使用起來(lái)較方便，但儲(chǔ)存穩(wěn)定性較之羧基微球稍差。而羧基微球則需經(jīng)過(guò)EDC/NHS活化之后，才與蛋白的氨基反應(yīng)，形成共價(jià)鍵。由于羧基微球本身不具有直接和蛋白質(zhì)反應(yīng)的性能，因此具有較強(qiáng)的化學(xué)穩(wěn)定性。兩種方法各有優(yōu)缺，在選擇的時(shí)候，需根據(jù)本身的情況進(jìn)行選擇。