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羧基磁珠 這類磁珠除了能夠像硅羥基磁珠一樣在高濃度離液鹽環(huán)境中結(jié)合核酸分子之外,還能通過另一種特殊的機(jī)制與核酸分子結(jié)合。通過向溶液中加入一定濃度的PEG和NaCl,可以使得核酸分子從伸展的構(gòu)象逐漸蜷縮成小球狀,其上的負(fù)電荷也大部分被屏蔽掉,促使核酸分子吸附到磁珠上。核酸分子的分子量越大,越傾向于發(fā)生這種從伸展線團(tuán)向蜷縮小球的構(gòu)象變化,因此,通過調(diào)節(jié)鹽溶液與核酸樣本的體積比,能夠?qū)崿F(xiàn)較大分子量的核酸片段在羧基磁珠表面的優(yōu)先吸附,達(dá)到所謂的片段篩選效應(yīng)。
以磁性微球為固相介質(zhì)對蛋白質(zhì)進(jìn)行提純是一項新興的蛋白質(zhì)分離技術(shù)。傳統(tǒng)的蛋白質(zhì)分離方法如鹽析、、膜分離技術(shù)、離子交換技術(shù)和層析技術(shù)等,通過改變pH值、溫度、離子強(qiáng)度、介電常數(shù)等因素來達(dá)到分離的目的,分離過程繁雜,而且目標(biāo)蛋白質(zhì)的損失大。而蛋白質(zhì)的磁分離是通過對磁性微球表面的改性,共價結(jié)合能被目標(biāo)蛋白質(zhì)識別和可逆結(jié)合的配基,然后進(jìn)行目標(biāo)蛋白質(zhì)的分離。在磁分離過程中,將磁性微球直接放入含有目標(biāo)蛋白質(zhì)的混合溶液中,目標(biāo)蛋白質(zhì)與磁性微球緊密結(jié)合,然后利用外部磁場進(jìn)行分離。整個分離過程不需對混合溶液的pH值、溫度、離子強(qiáng)度和介電常數(shù)進(jìn)行調(diào)整,從而避免了傳統(tǒng)分離過程中蛋白質(zhì)的損失。與傳統(tǒng)分離方法相比較,蛋白質(zhì)的磁分離技術(shù)具有快速、高純、高收率等優(yōu)點。
固定化酶是通過物理的或化學(xué)的方法,將酶分子束縛在載體上,使其既保持酶的天然活性,又便于與反應(yīng)液分離,可以重復(fù)使用,它是酶制劑中的一種新劑型。運用磁性高分子微球作為結(jié)合酶的載體,具有以下優(yōu)點:有利于固定化酶從反應(yīng)體系中分離和回收,操作簡便。對于雙酶反應(yīng)體系,當(dāng)一種酶的失活較快時,就可以用磁性材料來固載另一種酶,回收后反復(fù)使用,降低成本;磁性載體固載酶放入磁場穩(wěn)定的流動床反應(yīng)器中,可以減少持續(xù)反應(yīng)體系中的操作,適合于大規(guī)模連續(xù)化操作;利用外部磁場可以控制磁性材料固定化酶的運動方式和方向,替代傳統(tǒng)的機(jī)械攪拌方式,提高固定化酶的催化效率。
磁性微球在細(xì)胞標(biāo)記和細(xì)胞分離上的應(yīng)用
細(xì)胞分離是生物細(xì)胞學(xué)研究中一種十分重要的技術(shù),的細(xì)胞分離在細(xì)胞分離是生物細(xì)胞學(xué)研究中一種十分重要的技術(shù),的細(xì)胞分離在臨床中是首要的、重要的步驟。這種細(xì)胞分離技術(shù)在臨床診斷上有廣范的應(yīng)用,例如需在輻射前將抽出,且要將癌細(xì)胞從液中分離出來。
傳統(tǒng)的細(xì)胞分離技術(shù)主要采用離心法,利用密度梯度原理進(jìn)行分離,時間長、效果差。隨著合成磁性微球的發(fā)展,磁性微球在分離細(xì)胞方面已經(jīng)獲得了快速的發(fā)展,經(jīng)動物臨床試驗已獲成功。其中重要的是選擇一種生物活性劑或者其他配體活性物質(zhì)(如、熒光物質(zhì)、外源凝結(jié)素等),根據(jù)細(xì)胞表面糖鏈的差異,使其僅對特定細(xì)胞有親和力,從而達(dá)到分離、分類以及對其種類、數(shù)量分布進(jìn)行研究的目的。