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被測(cè)樣品顆粒顆粒在液相系統(tǒng)中的第二個(gè)來(lái)源是試樣。有些實(shí)驗(yàn)室把樣品放入自動(dòng)采樣盤(或人工進(jìn)樣)之前，首先要經(jīng)過(guò)一個(gè)0.45μ m針筒式過(guò)濾器過(guò)濾。這種方法可以有效地去除樣品中的微粒。但這一過(guò)程要注意一點(diǎn)：你用了針筒過(guò)濾器，不可能100%獲得經(jīng)過(guò)過(guò)濾器測(cè)試的樣品，總會(huì)有或多或少的損失。損失源于以下幾個(gè)方面：過(guò)濾器過(guò)濾膜的吸附、過(guò)濾器濾出微粒的吸附、針筒濾膜過(guò)濾器與針筒連接處的滲漏等。

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如有丟失，過(guò)濾后的液體中被測(cè)物的含量或濃度是否與原始樣液的含量或濃度相同？這通常需要通過(guò)實(shí)驗(yàn)加以證實(shí)。確定此步驟會(huì)增加工作量和成本。過(guò)濾是一種消耗，每臺(tái)過(guò)濾器的價(jià)格從幾元到十幾元。但是在分析食品中的殘留物時(shí)，由于底物大多比較復(fù)雜，因此過(guò)濾這一步就成為的步驟。實(shí)踐分析工作中，一般檢測(cè)每組樣品都要配外標(biāo)、加回收或質(zhì)控樣品，所以只要檢測(cè)得到的信噪比達(dá)到檢出限要求，就可以認(rèn)為這一步可以作為系統(tǒng)誤差而忽略。

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調(diào)整流量過(guò)快…防止壓力、溫度急劇變化和機(jī)械振動(dòng)。氣溫驟降或使色譜柱從高處落下，都會(huì)影響柱內(nèi)填充狀態(tài)；柱壓突然升高或降低，也會(huì)對(duì)柱內(nèi)填充物產(chǎn)生沖力，所以在調(diào)節(jié)流速時(shí)要緩慢進(jìn)行，在閥進(jìn)樣時(shí)閥的轉(zhuǎn)動(dòng)不能過(guò)緩(如前面所述)。反向色譜柱…一般情況下，色譜柱不能反沖，只有生產(chǎn)者指示柱可以反沖時(shí)，才能反沖去除留在柱頭的雜質(zhì)。反之，反向?qū)⒀杆俳档椭?。預(yù)加保護(hù)柱為了避免破壞固定相，應(yīng)選擇合適的流動(dòng)相(特別是 pH)。有時(shí)候，一預(yù)柱可以在進(jìn)樣器前連接，分析柱是硅膠粘合時(shí)，預(yù)柱為硅膠，可使流動(dòng)相在進(jìn)入分析柱前先被硅膠“飽和”，避免分析柱中的硅膠基質(zhì)溶解。

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不要把復(fù)雜的樣品，特別是生物樣品直接注入到柱中，需要對(duì)樣品進(jìn)行預(yù)處理，或者在進(jìn)樣器與色譜柱之間連接一個(gè)保護(hù)柱。保護(hù)柱一般為填充具有相似固定相的短柱?？梢砸矐?yīng)該經(jīng)常更換保護(hù)柱?！厩拜吔?jīng)驗(yàn)】如何排除小概率故障？【1】泵壓跳動(dòng)，跳動(dòng)范圍約10 bar。對(duì)策：原來(lái)的小白頭有點(diǎn)臟，換了以后還沒(méi)有解決；2、將主動(dòng)閥上的閥芯取出，發(fā)現(xiàn)類似于氣泡的存在，在超聲5分鐘內(nèi)浸入-水溶液中試著除去氣泡，重新安裝后觀察，仍未解決；更換新閥芯，安裝完畢后，再也沒(méi)有跳動(dòng)，觀察一段時(shí)間后比較平穩(wěn)，順利解決。

支招通常的柱效不太好，先排除其他問(wèn)題，沒(méi)問(wèn)題的話，就是柱子不行。假如柱子較老，可轉(zhuǎn)小流速?zèng)_水，我做過(guò)效果很好！(老式的圓柱啊，有點(diǎn)危險(xiǎn))。挖出已變色的填充物，并用同類新填充物，效果良好。當(dāng)柱內(nèi)死體積增大時(shí)，需要更換新柱，反向沖洗色譜柱柱，超聲清洗柱篩板。層析柱為消耗品，理論上，柱效非常低的色譜柱不能幸免，但有一種方法，即，在色譜柱沒(méi)救出來(lái)時(shí)，可以用它，反沖色譜柱，但要注意的是，流速不要太大，這樣的話，還要多堅(jiān)持一會(huì)兒。要是這也沒(méi)用的話，再買一次。

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假如這些柱子確實(shí)是舊的，那么可以試一試反相沖水，也許可以使用一段時(shí)間，但不會(huì)太久。接著就只能更換填料，或更換新的柱子。前一陣子我們的柱效也不太好，其他都很正常。隨后柱子被重新，柱效由原來(lái)的2000升至四千多。但在這個(gè)過(guò)程中不會(huì)維持一個(gè)月。概述一柱溫度可調(diào)高，三柱外體積小，第四柱采用超純硅膠。第5燈選擇能量高，第六采用中空透光燈。第六，改變有機(jī)相比，第八流動(dòng)相 pH鼓搗。九可以選擇鍵合相挑，第十變有機(jī)添加劑。十一，改變流動(dòng)相位比例，十二，縮短檢測(cè)響應(yīng)時(shí)間。