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ELISA試劑盒的成分
1 預(yù)包被板: 抗小鼠白介素-6兔子IgG,親合純化 96T
2 酶標記: (30倍濃縮)HRP標記抗小鼠白介素-6兔子IgG,親合純化 0.4mL x 1
3 標準品: 重組小鼠白介素-6 0.5mL x 2
4 緩沖液: 含1% BSA, 0.05%吐溫20 BPS 30mL x 1
5 標記稀釋液: 含1% BSA, 0.05%吐溫20 BPS 12mL x 1
6 顯色劑: TMB底物液 15mL x 1
7 終止液: 1N硫酸 12mL x 1
8 濃縮洗滌液: (40倍濃縮) 含1% BSA, 0.05%吐溫20 BPS 50mL x 1 操作說明 1實驗所需器材(但試劑盒沒有提供) (450nm) 微移液管及其吸嘴 量筒及燒杯 去離子水 冰箱(4°C) 坐標紙(log/log) 吸水紙 試管(用于標準品稀釋) 溫育箱(37°C ± 1°C) 洗瓶 (用于洗板) 一次性試劑管(用于濃縮酶標記和顯色劑)
Elisa試劑盒的優(yōu)點
1.特異性強:不與其它細胞反應(yīng)。
2.重復(fù)性好:板內(nèi)、板間變異系數(shù)均小于10%。
3.穩(wěn)定性高:實驗效果很穩(wěn)定。
4.超靈敏度:zui小的檢測濃度小于1號標準品,稀釋度和樣品線性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù)R值為0.990。
以上內(nèi)容由北京中檢維康生物技術(shù)有限公司提供,如需了解更多關(guān)于Elisa試劑盒的資訊,歡迎關(guān)注本公司網(wǎng)站。
Elisa試劑盒——Elisa實驗常見問題及解決方案
顯色淡,靈敏度偏低
1 試劑盒未充分平衡 試劑盒從2~8℃冰箱取出后打開盒蓋,于室溫平衡至少20分鐘,確保所有試劑已平衡至室溫(約25℃)
2 樣品不適合做ELISA檢測 樣品一般選擇培養(yǎng)上清、血漿。其他樣品形式可能不適合做ELISA檢測或者需要優(yōu)化檢測的條件(例如稀釋液的成分)
3 酶標板在貯存或洗后拍干時過分干燥 防止板過于干燥
4 包被遭到破壞 操作溫和,移液槍不能碰到孔底
5 樣本和孵育條件不合適 按照說明書條件,建議孵育過程中全程振蕩孵育。
6 洗滌浸泡時間過長 按照說明書操作。勿人為增加浸泡時間;
7 偶聯(lián)HRP試劑污染 棄去試劑,重新配置
8 錯誤的稀釋偶聯(lián)HRP試劑 棄去試劑,重新配置
9 TMB底物孵育時間過短,因非人為因素影響,需要優(yōu)化孵育時間 確定合適的孵育時間:人為判定-高濃度的標準品出現(xiàn)深藍色;S4-5有淡藍色;機器判定620 nm波長下測定OD值達到0.6-0.65
10 樣本濃度過高或存在基質(zhì)效應(yīng) 建議做不同稀釋倍數(shù),確認樣本稀釋倍數(shù)。
11 濾光片設(shè)置有問題或者波長選擇不對 確認儀器設(shè)置及選擇正確的波長檢測。
12 酶標板不適合做ELISA 不能使用細胞培養(yǎng)板,建議使用ELISA高吸附力板子。