三羥Tris是一種有機(jī)化合物，其CAS77-88-1,分子式為(HOCH2)3CNH2。作為一種常見的生物緩沖劑，三羥Tris不僅被廣泛用作核酸和蛋白質(zhì)的溶劑，蛋白質(zhì)電泳緩沖液的主要成分之一，還可生產(chǎn)多種化工、、產(chǎn)品，是制備表面活性劑、硫化促進(jìn)劑和一些的重要中間物。此外還可以用于制備復(fù)合相變材料。相變材料是指隨溫度變化而改變物質(zhì)狀態(tài)并能提供潛熱的物質(zhì)。當(dāng)物理狀態(tài)發(fā)生變化時(shí)，材料自身的溫度在相變完成前幾乎維持不變，形成一個(gè)寬的溫度平臺，但吸收或釋放的潛熱卻相當(dāng)大。

生物緩沖液Tris是一種氨基獨(dú)一不含鈉的氨基緩沖堿，不會給體系中帶入鈉、鉀離子，不影響滲透壓，必要時(shí)也可以加入生理鹽水調(diào)節(jié)鹽平衡。其對生物化學(xué)過程的影響很小，也不會與鈣、酶及重金屬離子生成沉淀，不影響激酶、磷酸酶、脫氫酶等多種酶的活性。通常用于DNA、RNA及蛋白質(zhì)相關(guān)的實(shí)驗(yàn)，常用緩沖體系有：Tris-HCl緩沖液、TBS緩沖液、TE緩沖液、TAE緩沖液、TBE緩沖液、Tris甘氨酸緩沖液、Tris磷酸緩沖液等。需要注意的是Tris的pH值受溫度影響較大，要注意控制好溫度；Tris溶液顯堿性，會吸收CO2，要注意密封。

   很多實(shí)驗(yàn)的pH值設(shè)定在 7.4以模仿生物條件。假如你的蛋白在這個(gè)pH值下是穩(wěn)定的，那就非常棒了！如果不是，就需要改變pH值找到目的蛋白在溶液中處于可溶性且不會降解的狀態(tài)。

       一個(gè)經(jīng)驗(yàn)法則是：蛋白在它等電點(diǎn)pI附近的pH值溶液中會表現(xiàn)得不易溶解，因?yàn)榈鞍自谄涞入婞c(diǎn)的pH值溶液中表面沒有凈電荷，從而容易聚集。這里推薦用Expasy的ProtParam工具快速簡便地計(jì)算蛋白等電點(diǎn)pI值，只要提交蛋白序列即可。

10mg/ml牛蛋白(BSA）：加100mg的牛蛋白（組分V或分子生物學(xué)試劑級，無DNA酶）于9.5ml水中（為減少變性，

須將蛋白加入水中，而不是將水加入蛋白），蓋好蓋后，輕輕搖動，直至牛蛋白完全溶解為止。不要渦旋混合。加水定容到10ml，然后分裝成小份貯存于-20℃。

1mol/L二硫蘇糖醇（DTT）：在二硫蘇糖醇5g的原裝瓶中加32.4ml水，分成小份貯存于-20℃?；蜣D(zhuǎn)移100mg的二硫蘇糖醇

至微量離心管，加0.65ml的水配制成1mol/L二硫蘇糖醇溶液。