廣州碩譜生物科技有限公司氰丙基SPE柱供應(yīng)商

溶劑環(huán)境的pH怎么影響化合物在小柱上的保留，為什么我們要關(guān)注化合物的pKa值，在C18小柱中需要考慮這些因素嗎？

我們來(lái)說(shuō)一下，Ka指的是酸度系數(shù)，又名酸離解常數(shù)，可以理解為酸離解H離子的能力，而pKa=-lgKa，對(duì)于酸，在環(huán)境pH下存在如下平衡：左邊的A-/HA，實(shí)際是指溶劑環(huán)境下，離子態(tài)和分子態(tài)的比例，右邊反映了左側(cè)兩者的轉(zhuǎn)化關(guān)系，取決于（pH-pKa)的數(shù)值大小。對(duì)于離子交換小柱，保持目標(biāo)物的離子化而非分子態(tài)，是一個(gè)關(guān)鍵點(diǎn)，這對(duì)于離子交換作用機(jī)理的交換柱，將直接關(guān)系到其實(shí)驗(yàn)成敗。而對(duì)于硅膠鍵合C18小柱的萃取，由于硅膠（—SiOH）不能完全“封端”，在pH大于4.0的情況下，硅膠都會(huì)帶上負(fù)電荷，因而會(huì)使得能電離的化合物與硅膠作用，增強(qiáng)了這種附帶的次級(jí)作用理（主作用力為非極性相互作用力），而使得此類物質(zhì)在硅膠-C18上的保留增強(qiáng)，若只考慮C18的非極性作用力，必然會(huì)導(dǎo)致回收結(jié)果的不盡人意。

固相萃取（Solid Phase Extraction，簡(jiǎn)稱SPE）,也稱固相提取，是一項(xiàng)結(jié)合了選擇性保留、選擇性洗脫等過(guò)程的分離技術(shù)。 SPE也是一個(gè)柱色譜分離過(guò)程，分離機(jī)理、固定相和溶劑的選擇等方面與高1效液相色譜（HPLC）有許多相似之處。

SPE的凈化模式主要取決于填充劑的類型和溶劑的性質(zhì)，有以下2種：

模式一：保留目標(biāo)物，去除雜質(zhì)固相萃取操作一般有四步（：

1）活化--除去小柱內(nèi)的雜質(zhì)并創(chuàng)造一定的溶劑環(huán)境（注意整個(gè)過(guò)程不要使小柱干涸）。

2）上樣--將樣品用一定的溶劑溶解，轉(zhuǎn)移入柱并使組分保留在柱上（注意流速不要過(guò)快，以1ml/min 為宜，zui大不超過(guò)5ml/min）。

3）淋洗--zui大程度除去干擾物（建議此過(guò)程結(jié)束后把小柱完全抽干）。

4）洗脫--用小體積的溶劑將被測(cè)物質(zhì)洗脫下來(lái)并收集（注意流速不要過(guò)快，以1ml/min為宜）。

GCB為何在農(nóng)殘檢測(cè)中常用于凈化模式而非富集模式？

回答： SPE的凈化方式多用于吸附雜質(zhì)，富集方式多用于吸附目標(biāo)物質(zhì)， GCB是一種石墨化碳黑，是在惰性氣氛下將炭黑加熱至2700-3000℃時(shí)烘焙而成，它由六個(gè)碳原子組成平面六角形，層疊而成，對(duì)于芳香平面分子，極易嵌入，而吸附芳香化合物則具有較強(qiáng)的選擇性，對(duì)其它分析物也有較好的吸附作用， GCB的吸附和解吸性能會(huì)直接影響到填料的使用范圍， GCB的吸附作用較強(qiáng)，但對(duì) GCB的吸附作用可逆性稍差，需要選擇適當(dāng)強(qiáng)度的溶劑才能釋放所吸附的物質(zhì)，因此解析溶劑的匹配比較困難，由于其對(duì)色素等的優(yōu)異吸附性能，因此在農(nóng)殘樣品處理中，常用于吸附色素等雜質(zhì)，而不是選擇用來(lái)吸附目標(biāo)化合物。

固相萃取

固相萃取是一種基于色譜分離的樣品前處理方法，是近年來(lái)應(yīng)用zui為廣泛和成熟的樣品前處理方法。固相萃取包括(含有某些官能團(tuán)的固體吸附劑)和液相(樣品和溶劑)。因?yàn)楣滔噍腿∥絼┚哂胁煌墓δ芑鶊F(tuán)，所以可以吸附和保留特定化合物于固相萃取柱。

固相萃取按其用途可分為兩種模式。其中， spe柱是典型的固相萃取方式，其主要作用是吸附被稱為目標(biāo)物吸附的化合物；雜質(zhì)吸附式固相萃取是指 spe柱吸附樣品中的雜質(zhì)，目標(biāo)物質(zhì)流穿不保留。

預(yù)柱或保護(hù)柱用還是不用的問題！原來(lái)分析中藥品種時(shí)，我一直都是用保護(hù)柱。但來(lái)到新公司后，發(fā)現(xiàn)大家都沒有使用，幾個(gè)實(shí)驗(yàn)室連保護(hù)柱都沒找到一個(gè)，也就是說(shuō)大家從來(lái)都沒有用過(guò)。后來(lái)問一個(gè)老員工，說(shuō)是有可能影響藥品分析。我就想問：安裝保護(hù)柱后會(huì)影響樣品分析嗎？我們做的大多是頭1孢類的抗1生素。

答：應(yīng)該這樣說(shuō)，加上保護(hù)柱，肯定有利于保護(hù)色譜柱不受一些顆粒物質(zhì)的堵塞，肯定有害于分離度和柱效，因?yàn)楸Ｗo(hù)柱中間有著死體積的存在但是如果保護(hù)柱接得好，并且盡量控制其匹配性和經(jīng)常更換，分離度和柱效應(yīng)該影響并不大。