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發(fā)布時(shí)間:2021-05-27 08:01  
主要設(shè)備編輯試劑(1) 包被緩沖液(PH9.60.05M碳酸鹽緩沖液):Na2CO3 1.59克NaHCO3  2.93克加蒸餾水至1000ml(2) 洗滌緩沖液(PH7.4PBS):0.15MKH2PO4  0.2克Na2HPO4·12H2O 2.9克NaCl 8.0克KCl 0.2克Tween-20 0.05% 0.5ml加蒸餾水至1000ml(3) 稀釋液:牛白蛋白(BSA) 0.1克加洗滌緩沖液至100ml或以羊、兔等與洗滌液配成5~10%使用。


安全性1. 避免直接接觸終止液和底物A、B。一旦接觸到這些液體,請(qǐng)盡快用水沖洗。2. 實(shí)驗(yàn)中不要吃喝、抽煙或使用化妝品。3. 不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份。4. 試劑應(yīng)按標(biāo)簽說(shuō)明書(shū)儲(chǔ)存,使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過(guò)后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄,不可保存。5. 實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。6. 不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號(hào)的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。


使用貼壁細(xì)胞時(shí):① 棄盡培養(yǎng)液,向培養(yǎng)皿中加入650 μl的Solution A,室溫靜置1分鐘。注)96孔板等的每個(gè)孔中一次容納不了650 μl 溶液時(shí),請(qǐng)分?jǐn)?shù)次處理細(xì)胞。② 用移液槍的槍頭吹落貼壁培養(yǎng)細(xì)胞,取650 μl的細(xì)胞懸浮液轉(zhuǎn)移至Collection Tube中。③ 加入0.8 μl的RNase A1,激烈振蕩15秒鐘,然后室溫靜置1分鐘。2. 加入400 μl的Solution B,振蕩混合。3. 加入1 ml的4℃預(yù)冷的Solution C,充分混勻后,12,000 rpm離心2分鐘。4. 棄去上層有機(jī)相,再加入1 ml的4℃預(yù)冷的Solution C,充分混勻后,12,000 rpm離心2分鐘。


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