為避免提取的核酸在柜內(nèi)反復(fù)循環(huán)，造成標(biāo)本之間的交叉污染，出現(xiàn)假陽(yáng)性結(jié)果，該區(qū)域配備的生物安全柜必須是B2型的。生物安全柜工作區(qū)垂直氣流全部來(lái)自實(shí)驗(yàn)室，排風(fēng)經(jīng)過(guò)過(guò)濾器(www.rfilter.com)過(guò)濾后直接排至室外，不允許回到安全柜和實(shí)驗(yàn)室中。

根據(jù)經(jīng)驗(yàn)，如果實(shí)驗(yàn)室內(nèi)配備生物安全柜，每配備一臺(tái)，實(shí)驗(yàn)室的面積增加10m2;標(biāo)本制備區(qū)的面積宜在25m2~30m2之間。本區(qū)的壓力梯度要求為:相對(duì)于鄰近區(qū)域?yàn)檎龎海员苊鈴泥徑鼌^(qū)進(jìn)入本區(qū)的氣溶膠污染。

擴(kuò)增室該區(qū)域主要進(jìn)行的操作為DNA或cDNA擴(kuò)增。此外，已制備的DNA模板和合成的cDNA(來(lái)自樣本制備區(qū))的加入和主反應(yīng)混合液(來(lái)自試劑貯存和制備區(qū))制備成反應(yīng)混合液等也可在本區(qū)內(nèi)進(jìn)行。

在巢式PCR測(cè)定中，通常在輪擴(kuò)增后必須打開(kāi)反應(yīng)管，因此巢式擴(kuò)增有較高的污染危險(xiǎn)性，第二次加樣必須在本區(qū)內(nèi)進(jìn)行。

擴(kuò)增室主要配備PCR實(shí)驗(yàn)室的核心儀器PCR儀，本文實(shí)例中使用了ABI7500和ABI9700兩種PCR儀。

在實(shí)驗(yàn)室建造過(guò)程中，需要給PCR儀配備專門的UPS電源，以保證其正常工作。該區(qū)面積控制在15m2~20m2。

本區(qū)的壓力梯度要求為:相對(duì)于鄰近區(qū)域?yàn)樨?fù)壓，以避免氣溶膠從本區(qū)漏出。為避免氣溶膠所致的污染，應(yīng)盡量減少在本區(qū)內(nèi)的不必要的走動(dòng)。個(gè)別操作如加樣等應(yīng)在超凈臺(tái)內(nèi)進(jìn)行。建議采用5~10Pa壓差，在控制上比較容易實(shí)現(xiàn)。

集成式核酸檢測(cè)實(shí)驗(yàn)室設(shè)計(jì)依據(jù)

集成式核酸檢測(cè)實(shí)驗(yàn)室應(yīng)主要根據(jù)以下規(guī)范及要求進(jìn)行設(shè)計(jì)、建設(shè)：

?新型冠狀病毒的實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)技術(shù)指南(第三版)?機(jī)構(gòu)臨床基因擴(kuò)增檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)室管理辦法2010?GB 50346-2011 生物安全實(shí)驗(yàn)室建筑技術(shù)規(guī)范?GB19489-2008 實(shí)驗(yàn)室生物安全通用要求?GB50849-2014 ：建筑設(shè)計(jì)規(guī)范?GB50686-2011 ：建筑施工及驗(yàn)收規(guī)范?GB/T35428-2017 ：醫(yī)院負(fù)壓隔離病房環(huán)境控制要求?WS 233-2002微生物和生物醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室生物安全通用準(zhǔn)則

1）按照PCR實(shí)驗(yàn)室凈化 程安全規(guī)定進(jìn)行施工現(xiàn)場(chǎng)操作，及早發(fā)現(xiàn)并消除施工現(xiàn)場(chǎng)的安全隱患問(wèn)題，從而保障施工安全與質(zhì)量。結(jié)合現(xiàn)場(chǎng)施工的全過(guò)程進(jìn)行質(zhì)量技術(shù)管控，遵循國(guó)家制定的工程法律法規(guī)，依據(jù)工程總體設(shè)計(jì)的圖紙方案，科學(xué)合理地保障現(xiàn)場(chǎng)施工的質(zhì)量實(shí)施規(guī)范化，不斷提升凈化工程現(xiàn)場(chǎng)施工管理的效率，有效降低建筑企業(yè)的經(jīng)濟(jì)損失及利潤(rùn)。結(jié)合實(shí)際情況，對(duì)現(xiàn)場(chǎng)施工進(jìn)度及成本進(jìn)行科學(xué)地調(diào)整。在確保順利完成工期的同時(shí)，還要保障現(xiàn)場(chǎng)施工的安全質(zhì)量技術(shù)。這就需要在總體規(guī)劃設(shè)計(jì)方案中，加大對(duì)現(xiàn)場(chǎng)施工管理實(shí)施方案的力度，確保PCR實(shí)驗(yàn)室凈化順利完工，排除各種因素引起的故障，有效保障施工總體建設(shè)質(zhì)量達(dá)到規(guī)范要求。