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三(羥)Tris緩沖液為弱堿性溶液,DNA在這樣的溶液中會被去質(zhì)子化,從而提高其溶解性。人們常常在Tris鹽酸緩沖液中加入EDTA制成“TE緩沖液”,TE緩沖液被用于DNA的穩(wěn)定和儲存。如果將調(diào)節(jié)pH值的酸溶液換成,則獲得“TAE緩沖液”(Tris/Acetate/EDTA),而換成硼酸則獲得“TBE緩沖液這兩種緩沖液通常用于核酸電泳實驗中。
生化檢測:Tris通常是作為生物緩沖劑,來維持生化反應(yīng)的pH值,由于本身顯弱堿性,通常搭配酸一起使用。常用的有Tris-鹽酸、Tris-磷酸鹽、Tris-醋酸 EDTA、Tris-硼酸 EDTA、Tris-甘氨酸等。主要是用于核酸、蛋白質(zhì)溶解的緩沖液,蛋白質(zhì)印跡電泳緩沖液、DNA印跡實驗緩沖液、DNA瓊脂糖凝膠電泳緩沖液等。在反應(yīng)體系中通常有酶、蛋白質(zhì)及各種等,對緩沖劑要求時比較高的,因此采購時需要選擇精制產(chǎn)品的廠家,純度高、雜質(zhì)少才能保證生化實驗的準(zhǔn)確性。該類型緩沖劑溫度效應(yīng)大,易吸收空氣中的二氧化碳,使用時需要注意。
5mol/L氯化鈉(NaCl):溶解29.2g氯化鈉于足量的水中,定容至100ml。
10N(NaOH):溶解400g顆粒于約0.9L水的燒杯中(磁力攪拌器攪拌),完全溶解后用水定容至1L。
10%SDS(十二烷基硫酸鈉):稱取100gSDS慢慢轉(zhuǎn)移到約含0.9L的水的燒杯中,用磁力攪拌器攪拌直至完全溶解。用水定容至1L。
2mol/L山梨(糖)醇(Sorbitol):溶解36.4g山梨(糖)醇于足量水中使終體積為100ml。