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什么是試劑盒?
ELISA試劑盒在國(guó)內(nèi)有許多種叫法,例如:ELISA檢測(cè)試劑盒、ELISA Kit、酶聯(lián)試劑盒、酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒、酶聯(lián)分析試劑盒、酶免試劑盒等,比較常見的叫法是ELISA檢測(cè)試劑盒、酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒等。
ELISA試劑盒自從60-70年代問世以來,得到全世界科研工作者的認(rèn)可及推崇,在歐美及中國(guó)獲得很大的推廣,尤其是國(guó)內(nèi)生化領(lǐng)域的長(zhǎng)足發(fā)展。
ELISA試劑盒的操作方法——間接法
以下是北京中檢維康生物技術(shù)有限公司為您一起分享的內(nèi)容,北京中檢維康生物技術(shù)有限公司專業(yè)供應(yīng)ELISA試劑盒,歡迎新老客戶蒞臨。
1.用包被緩沖液將已知抗原稀釋至1~10μg/ml,每孔加0.1ml,4℃過夜;
2.次日洗滌3次;
3.加一定稀釋的待檢樣品(未知)0.1ml于上述已包被之反應(yīng)孔中,置37℃孵育1小時(shí),洗滌;
4.(同時(shí)做空白、陰性及陽性孔對(duì)照)于反應(yīng)孔中,加入新鮮稀釋的酶標(biāo)第二(抗)0.1ml;
5.37℃孵育35-60分鐘,洗滌;
6.然后用DDW洗滌。
其余步驟同“雙夾心法”的4、5、6。
Elisa試劑盒技術(shù)原理
(1). 抗原或的固相化及抗原或的酶標(biāo)記。
(2). 結(jié)合在固相載體表面a的抗原或仍保持其活性。
(3). 酶標(biāo)記的抗原或既保留其活性,又保留酶的活性。
(4). 受檢標(biāo)本與固相載體表面的抗原或起反應(yīng)。再加入酶標(biāo)記的抗原或,也通過反應(yīng)而結(jié)合在固相載體上。
(5). 此時(shí)固相上的酶量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量呈一定的比例。
(6). 加入酶反應(yīng)的底物后,底物被酶催化成為有色產(chǎn)物,產(chǎn)物的量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量直接相關(guān),故可根據(jù)呈色的深淺進(jìn)行定性或定量分析。測(cè)定方法具有很高的敏感度(pg-ng/ml水平),并且重復(fù)性好。以反應(yīng)為基礎(chǔ),將抗原、的特異性反應(yīng)與酶對(duì)底物的有效催化作用相結(jié)合起來的一種敏感性很高的試驗(yàn)技術(shù)。