偏光顯微鏡在裝置上的要求

（1）光源：采用單色光，因?yàn)楣獾乃俣?，折射率和干涉現(xiàn)象由于波長的不同而有差異。一般鏡檢可使用普通光。

（2）目鏡：要帶有十字線的目鏡。

（3）聚光鏡：為了取得平行偏光，應(yīng)使用能推出上透鏡的搖出式聚光鏡。

（4）起偏鏡：要求偏振方向?yàn)闁|西方向，可以任意旋轉(zhuǎn)90°以上。

（5）檢偏鏡：要求偏振方向?yàn)槟媳狈较?，可以任意角度旋轉(zhuǎn)，需附刻度游標(biāo)，以方便檢測與定量分析。

（6）伯特蘭透鏡（勃氏鏡）：是把物體所有造成的初級相放大為次級相的輔助透鏡。它可保證用目鏡來觀察在物鏡后焦平面中形成的平涉圖與偏光圖（黑十字），而且還可用于調(diào)節(jié)顯微鏡的孔徑光闌時使用，尤其是在高倍物鏡時，由于物視場小，使用勃氏鏡可以用目鏡觀察而充滿整個視場。

（7）波長片（或稱為波片、試板、補(bǔ)色器、補(bǔ)償器等）：將已知的非均質(zhì)晶體磨制成一定厚度的定向薄片，標(biāo)定其光程差與快、慢光方向，根據(jù)補(bǔ)色原理測定物質(zhì)光學(xué)性質(zhì)與鑒定物質(zhì)類型，波長片可分為以下幾種：

①固定光程差補(bǔ)色器

a．1/4λ波片（云母試板）：光程差為鈉光（589nm）或綠光（546nm）的1/4波長，在正交偏光下處于45°位置時呈現(xiàn)一級灰的干涉色。

b．λ波片(石膏試板)：光程差為鈉光（589nm）或綠光（546nm）的1個波長，在正交偏光下處于45°位置時呈現(xiàn)一級紅的干涉色。

上述波長片的快、慢光方向可以在插板上標(biāo)識，一般快光方向平行插板方向，慢光方向垂直插板方向。

②可變光程差補(bǔ)色器

a．石英楔子（Quarzkeil/Quartz）：是將無色透明的石英晶體平行于光軸切制成楔形薄片而形成，厚度一般為0～0.2mm，慢光方向常用γ或N表示，插入過程中會呈現(xiàn)出一至四級的干涉色，由暗灰色至黃色變化。

b．貝瑞克補(bǔ)色器（Break Compensator）：是一種繞軸旋轉(zhuǎn)變化而進(jìn)行光程差測定的補(bǔ)色器，于1913年成功試制后，現(xiàn)已獲得了廣泛的應(yīng)用。

偏光顯微鏡物鏡的鑒別率

物鏡的鑒別率是指物鏡具有將兩個物點(diǎn)清晰分辨的能力，以兩個物點(diǎn)能清晰分辨的距離d的倒數(shù)表示。d愈小，表示物鏡的鑒別率愈高。

要明白鑒別率可以有一定的限度，這就要用光通過透鏡后產(chǎn)生衍射現(xiàn)象來解釋。物體通過光學(xué)儀器成象時，每一物點(diǎn)對應(yīng)有一象點(diǎn)，但由于光的衍射，物點(diǎn)的象不再是一個幾何點(diǎn)，而是有一定大小的衍射亮斑?？拷膬蓚€物點(diǎn)所成的象一兩個亮斑如果互相重疊，則導(dǎo)致這兩個物點(diǎn)分辨不清，從而限制了光學(xué)系統(tǒng)的分辨本領(lǐng)一分辨率。顯然，象面上衍射圖象中央亮斑半徑愈大，系統(tǒng)的分辨本領(lǐng)愈小。

瑞利（Rayleigh）提出一個推測（又稱瑞利準(zhǔn)則）：認(rèn)為當(dāng)A1′衍射花樣的值正好落在A2′衍射花樣的極大值時，A1、A2是可以分辨的，將此時定出的兩物點(diǎn)距離A1、A2作為光學(xué)統(tǒng)的分辨極限。θ0稱為極限分辨角。不言而喻，當(dāng)θ＞θ0時是完全可分辨的，θ＜θ0時是不可分辨的。

由圓孔衍射理論得到：θ0=1.22λ / D

式中λ──入射光波長；

D──入射光的允許孔徑（透鏡直徑）。

因?yàn)棣?很小，所以由圖2-4得：

d′≈θ0=1.22λS / D

物鏡在設(shè)計(jì)時，總是使它滿足阿貝正弦條件的，即

ndsinu=n′d′sinu′

式中n和n′為物、象所在空間的折射率，成象總是在空氣介質(zhì)中，故n′=1；u各u′分別為光線在物、象空間共軛點(diǎn)上的孔徑角；d和d′分別為物點(diǎn)、象點(diǎn)中心斑的間距。

考慮到顯微鏡中入射光并非都是平行光，有傾斜光線，對上式系數(shù)作適當(dāng)?shù)男拚?，所以式中nsinu就是物鏡的數(shù)值孔徑，因此，上式或者寫：d=0.5λ/N.A

因此表明：物鏡的數(shù)值孔徑愈大，入射光的波長愈短，則物鏡的分辨能力愈高。在可見光中，觀察時常用黃綠光（λ ≈4400A），則可使分辨能力提高25%左右

偏光顯微鏡小知識_光學(xué)

偏光顯微鏡小知識

　偏光顯微鏡在光學(xué)顯微鏡的光學(xué)系統(tǒng)中插入了起偏振鏡和檢偏振器，用以檢查樣品的各向異性和雙折射性的顯微鏡。起偏振鏡和檢偏振鏡都是由偏光棱鏡或偏光板的尼科耳(nicol)棱鏡制成。前者安裝在光源與樣品之間，后者安裝在接物鏡與接目鏡之間或接目鏡之上。在生物樣品中，肌肉纖維、骨骼和牙齒等具有各向異性，淀粉粒、染色體和紡錘體等具有雙折射性，因此被用于組織細(xì)胞的化學(xué)研究。光源單波長光線。由于生物樣品比金相、巖石或結(jié)晶的雙折射性顯著微弱，所以有時也借敏感的檢偏振板造成的相加相減現(xiàn)象而利用其干涉色。

偏光顯微鏡Z重要的部件是偏光裝置

偏光的產(chǎn)生及其作用

偏光顯微鏡Z重要的部件是偏光裝置——起偏器和檢偏器。當(dāng)普通光通過它后，就能獲得只在一直線上振動的直線偏振光。

偏光顯微鏡有兩個偏振鏡，一個裝置在光源與被檢物體之間的叫“起偏鏡”；另一個裝置在物鏡與目鏡之間的叫“檢偏鏡”。 從光源射出的光線通過兩個偏振鏡時，如果起偏鏡與檢偏鏡的振動方向互相平行，即處于“平行檢偏立”的情況下，則視場Z為明亮。反之，若兩者互相垂直，即處于“正交校偏位”的情況下，則視場完全黑暗，如果兩者傾斜，則視場表明出中等程度的亮度。由此可知，起偏鏡所形成的直線偏振光，如其振動方向與檢偏鏡的振動方向平行，則能完全通過；如果偏斜，則只以通過一部分；如若垂直，則完全不能通過。因此，在采用偏光顯微鏡檢時，原則上要使起偏鏡與檢偏鏡處于正交檢偏位的狀態(tài)下進(jìn)行。