PCR實驗室平面布局

臨床基因擴增檢測實驗室原則上分為四個單獨的工作區(qū)域：試劑貯存和準備區(qū)、標本制備區(qū)、擴增反應混合物配置和擴增區(qū)、擴增產物分析區(qū)。為避免交叉污染，進入各個工作區(qū)域必須嚴格遵循單一方向進行，即只能從試劑貯存和準備區(qū)—標本制備區(qū)—擴增反應混合物配置和擴增區(qū)—擴增產物分析區(qū)。

三實驗室空調通風系統(tǒng)設計及壓力控制

PCR實驗室并沒有嚴格的凈化要求，但是為了避免各個實驗區(qū)域間交叉污染的可能性，宜采用全送全排的氣流組織形式。同時，要嚴格控制送、排風的比例以保證各實驗區(qū)的壓力要求。1.試劑貯存和準備區(qū)該實驗區(qū)主要進行的操作為貯存試劑的制備、試劑的分裝和主反應混合液的制備。試劑和用于標本制作的材料應直接運送至該區(qū)，不得經過其他區(qū)域。試劑原材料必須貯存在本區(qū)內，并在本區(qū)內制備成所需的貯存試劑。對與氣流壓力的控制，本區(qū)并沒有嚴格的要求。2.標本制備區(qū)該區(qū)域主要進行的操作為臨床標本的保存、核酸（RNA、DNA）提取、儲存及其加入至擴增反應管和測定RNA時cDNA的合成。

本區(qū)的壓力梯度要求為：相對于鄰近區(qū)域為正壓，以避免從鄰近區(qū)進入本區(qū)的氣溶膠污染。另外，由于在加樣操作中可能會發(fā)生氣溶膠所致的污染，所以應避免在本區(qū)內不必要的走動。

為避免提取的核酸在柜內反復循環(huán)，造成標本之間的交叉污染，出現(xiàn)假陽性結果，該區(qū)域配備的生物安全柜必須是B2型的。生物安全柜工作區(qū)垂直氣流全部來自實驗室，排風經過過濾器(www.rfilter.com)過濾后直接排至室外，不允許回到安全柜和實驗室中。

根據經驗，如果實驗室內配備生物安全柜，每配備一臺，實驗室的面積增加10m2;標本制備區(qū)的面積宜在25m2~30m2之間。本區(qū)的壓力梯度要求為:相對于鄰近區(qū)域為正壓，以避免從鄰近區(qū)進入本區(qū)的氣溶膠污染。

擴增室該區(qū)域主要進行的操作為DNA或cDNA擴增。此外，已制備的DNA模板和合成的cDNA(來自樣本制備區(qū))的加入和主反應混合液(來自試劑貯存和制備區(qū))制備成反應混合液等也可在本區(qū)內進行。

在巢式PCR測定中，通常在輪擴增后必須打開反應管，因此巢式擴增有較高的污染危險性，第二次加樣必須在本區(qū)內進行。

擴增室主要配備PCR實驗室的核心儀器PCR儀，本文實例中使用了ABI7500和ABI9700兩種PCR儀。

在實驗室建造過程中，需要給PCR儀配備專門的UPS電源，以保證其正常工作。該區(qū)面積控制在15m2~20m2。

本區(qū)的壓力梯度要求為:相對于鄰近區(qū)域為負壓，以避免氣溶膠從本區(qū)漏出。為避免氣溶膠所致的污染，應盡量減少在本區(qū)內的不必要的走動。個別操作如加樣等應在超凈臺內進行。建議采用5~10Pa壓差，在控制上比較容易實現(xiàn)。

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弱電、中央管理站

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信號源采用5G無線信號，并于實驗室內預留信息點位，保證實驗數據信息傳輸暢通；

所有室外門設有門禁裝置，所有房間均設有監(jiān)控攝像頭，保證圖像監(jiān)控全覆蓋，并于弱電箱內設有存儲裝置，并考慮將圖像通過5G信號傳至云存儲裝置；

在控制室設置一套完整的中央管理站系統(tǒng)，用于系統(tǒng)的組態(tài)、編程、 故障診斷等，同時為管理人員實現(xiàn)集中操作并提供有效準確的數據，使實驗室各個設備形成有效合理的運行秩序，以達到能源的有效節(jié)約。

中央管理站應具有系統(tǒng)動態(tài)圖像顯示，數據采集、能耗管理、報表打印，動力設備的啟停控制與監(jiān)視，各類參數的實時控制與監(jiān)視，設備非正常狀態(tài)報警，對實驗室各個子系統(tǒng)進行綜合管理等功能。