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采用兩譜聯(lián)用定性方法

HPLC中常采用紫外光、紅外對也要色譜進(jìn)行全波長掃描。然而，在工業(yè)生產(chǎn)中，常采用紫外檢測儀掃描 HPLC中的有機化合物，通過 HPLC反應(yīng)定性地得出一些未知有機化合物的有用信息。通過相關(guān)工作人員長期的經(jīng)驗，他們傾向于用液相色譜的大值對紫外線進(jìn)行掃描，通過全波長掃描尋找兩個液相色譜高峰之間的聯(lián)系，然后通過上一步使用保留值的定性分析方法，對液相色譜中的未知無進(jìn)行性質(zhì)的判斷。除了這些，工作人員為了使現(xiàn)代的液相色譜定性分析方法更廣泛地應(yīng)用，一般采用色譜與質(zhì)譜聯(lián)用，這樣的操作可以對未知的有機化合物進(jìn)行多層次的質(zhì)譜分析，提高液相色譜的定性分析水平，在某個方面也促進(jìn)了液相色譜與質(zhì)譜的聯(lián)系和應(yīng)用，為現(xiàn)代液相色譜分析方法提供了非常有效的兩用色譜定性分析方法。隨著科技的不斷進(jìn)步，串聯(lián)質(zhì)譜技術(shù)的應(yīng)用，使得現(xiàn)代 HPLC以雙譜聯(lián)用定性分析法廣泛應(yīng)用于中藥領(lǐng)域，在中藥品種、藥品鑒定等方面技術(shù)十分成熟，同時成果也十分顯著。除采用 HPLC和 MS聯(lián)用技術(shù)外，還采用了色譜與 NMR聯(lián)用等技術(shù)，這是一種實用的兩譜聯(lián)用技術(shù)，由于這一技術(shù)對定性要求不高，因此具有很好的通用性，但也因為色譜和 NMR聯(lián)用技術(shù)的要求較低，所以它在實際應(yīng)用中的使用也較少。

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液相色譜儀輸液系統(tǒng)：

輸注系統(tǒng)即高壓恒流泵，其作用是提供穩(wěn)定、準(zhǔn)確的流量。

1、溶劑過濾頭。液體過濾頭或沉淀器主要用于過濾在流動相中可能存在的顆粒狀雜質(zhì)。長期使用后，雜質(zhì)會堵塞溶劑過濾頭的濾板孔隙，或長期使用緩沖液，過濾頭表面很容易形成一層膜，妨礙正常的流動相通過。嚴(yán)重者，即使是已經(jīng)超聲處理的溶劑，泵吸液時仍會有氣泡在四氟化輸液管中產(chǎn)生，因此要經(jīng)常清洗。清潔劑可選用乙醇或30%稀硝i酸溶液，正相系統(tǒng)需注意濾頭干燥。

2、單向閥。本單向閥的作用是確保液體朝一個方向流動，保證高壓恒流泵的穩(wěn)定注入。在日常使用中，可通過觀察壓力情況初步判斷流量是否正常。若系統(tǒng)經(jīng)過一定時間平衡，壓力應(yīng)穩(wěn)定。但是如果有壓力波動，就表示流量是不穩(wěn)定的，如果沒有壓力，表示沒有流動。大多數(shù)情況下都是由于氣門中混入了氣泡或雜質(zhì)。如果出現(xiàn)氣泡，應(yīng)將放空閥打開，按沖洗鍵將氣泡從內(nèi)部排出。如單向閥與雜質(zhì)混在一起，必須清洗。清潔溶劑可選用乙醇，安裝時要注意標(biāo)記環(huán)向。

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目前常用的抑制型離子色譜抑i制劑主要是用抑i制劑，而普通的液相色譜沒有類似的設(shè)備。該抑i制劑在結(jié)構(gòu)上類似于液相色譜的柱后衍生系統(tǒng)，但抑制型離子色譜所必需的成分之一。非抑制性離子色譜不需要抑制器，類似于液相色譜儀，某些非抑制型離子色譜基本都是采用液相色譜泵、流路和進(jìn)樣閥。

離子色譜和液相色譜儀的另一個不同之處是檢測器，一般來說，液相色譜采用紫外-可見光度檢測器；離子色譜用電導(dǎo)儀檢測。

子色譜和液相色譜的另一個不同之處是分析對象，液相色譜作為一種分析儀器中使用較多的一類儀器，在許多領(lǐng)域得到了廣泛的應(yīng)用，但在一般情況下，采用液相色譜時，對被測物的吸收要有一定的光度，因此液相色譜一般可用于分析有機化合物。但離子色譜主要利用離子在水溶液中的電離產(chǎn)生電導(dǎo)的特性，因此離子色譜主要用于無機離子的分析。離子色譜和液相色譜的應(yīng)用當(dāng)然不是，目前離子色譜已被廣泛用于有機化合物的分析，液相色譜也可以解決無機離子的分析，兩者具有互補作用。存在液相色譜不能解決分析難題，可用離子色譜法解決。

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查看了資料說質(zhì)譜儀要高真空的原因，有幾點不明白，請高人解答。

原因：

1、離子的平均自由行程必須大于離子源到收集器的飛行距離。

2、在離子源中的高氣壓可產(chǎn)生高達(dá)數(shù)千伏的加速電壓放電。

3、離子分子在離子盒中的高壓作用下，發(fā)生了質(zhì)譜圖變化。

回答：

1、平均自由程是指分子(離子)兩次碰撞所經(jīng)過的路程，當(dāng)分子發(fā)生碰撞時，離子的運動方向和速率都會發(fā)生變化，在質(zhì)譜中離子的平均自由程越大，那么在有限長的真空腔體內(nèi)發(fā)生分子間或離子間的碰撞就越少，有利于提高分辨率，如果真空低，平均自由程就短，分子之間的碰撞就頻繁，分辨率降低。

2、如果真空腔的真空腔真空度很低，比如幾 Pa到幾十 Pa，那么根據(jù)放電的佳條件可以看出，此時高壓特別容易放電；此外，如果系統(tǒng)使用 EI燈絲，真空度要高于10-3 Pa，以防止 EI燈絲燒斷。

3、在高壓下，離子分子反應(yīng)這個就不用多說了， CID就是典型的由人為離子分子反應(yīng)而得的離子碎片。

還有一點需要真空的地方就是，目前所用的微通板、電子倍增器等信號放大系統(tǒng)在高真空狀態(tài)下才能達(dá)到應(yīng)有的效果。