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發(fā)布時(shí)間:2021-08-07 21:03  






等溫核酸試劑盒

普通的提取實(shí)驗(yàn)用國(guó)產(chǎn)的試劑盒就足以,價(jià)格不高,基本上各地均有現(xiàn)貨,如天根(目前國(guó)內(nèi)生產(chǎn)的試劑盒中銷(xiāo)售面比較廣的一種)等,其價(jià)格比進(jìn)口試劑盒要便宜許多,且效果還不錯(cuò),還可以。

當(dāng)然,就RNA的提取而言,不一定試劑盒的提取效果就非常好,其實(shí)采用一些經(jīng)典的RNA提取方法,效果也很不錯(cuò),如:TRIZOL、EDTA等,只是試劑盒使用方便,經(jīng)典的方法操作復(fù)雜一些。



核酸試劑盒的原理

核酸檢測(cè),其實(shí)就是通過(guò)檢測(cè)熒光信號(hào)的累積來(lái)確定樣本中是否有病毒核酸?,F(xiàn)在核酸檢測(cè)試劑盒(多重?zé)晒釸T-PCR法),能夠?qū)崿F(xiàn)一小時(shí)快速診斷。

根據(jù)銳科技發(fā)布的文章《如何進(jìn)行核酸檢測(cè)帶你揭秘全過(guò)程》,目前的病毒核酸檢測(cè)試劑盒,多數(shù)采用熒光定量PCR方法。檢測(cè)原理是以病毒的基因序列為檢測(cè)靶標(biāo),通過(guò)PCR擴(kuò)增,使我們的選擇這段靶標(biāo)DNA序列指數(shù)級(jí)增加,每一個(gè)擴(kuò)增出來(lái)的DNA序列,都可與我們預(yù)先加入的一段熒光標(biāo)記探針結(jié)合,產(chǎn)生熒光信號(hào),擴(kuò)增出來(lái)的靶基因越多,累計(jì)的熒光信號(hào)就越強(qiáng)。



與假陰性相對(duì)的是假陽(yáng)性。這通常是由于樣本被污染或是核酸檢測(cè)試劑盒被污染導(dǎo)致的?!叭鄙賴?yán)格控制條件的實(shí)驗(yàn)室環(huán)境、不的檢測(cè)操作,以及樣本本身的污染,都會(huì)導(dǎo)致假陽(yáng)性出現(xiàn)?!庇腥烁嬖V記者,“由于事發(fā)突然,很多地方可能沒(méi)有檢測(cè)條件,因此需要把樣本送到符合條件的實(shí)驗(yàn)室去,而運(yùn)輸途中也有污染風(fēng)險(xiǎn)?!贝送猓瑱z測(cè)試劑盒的探針引物或酶受到污染之后,也會(huì)出現(xiàn)假陽(yáng)性。



近年來(lái),等溫?cái)U(kuò)增方法的發(fā)展讓基因檢測(cè)得以擺脫熱循環(huán)儀器的使用,因此更加便捷化?;诘葴?cái)U(kuò)增方法,多種具有POCT潛力的SARS-CoV-2檢測(cè)技術(shù)得以開(kāi)發(fā)出來(lái)。特別是結(jié)合CRISPR技術(shù)后,檢測(cè)的特異性和靈敏度得到了進(jìn)一步提升。盡管如此,幾乎所有這些報(bào)道的技術(shù)僅僅證明了其在單基因檢測(cè)中的應(yīng)用。然而,臨床認(rèn)可的金標(biāo)準(zhǔn)方法,如RT-qPCR,通常需要檢測(cè)兩個(gè)基因。因?yàn)殡p基因檢測(cè)能夠有效地避免因基因部分降解,基因拷貝數(shù)差異和擴(kuò)增錯(cuò)誤等引起的潛在假陰性結(jié)果。




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