DNA提取過程中各種試劑的作用及原理

　　溶液I—溶菌液：

　　溶菌酶：它是糖苷水解酶，能水解菌體細(xì)胞壁的主要化學(xué)成分肽聚糖中的β-1,4糖苷鍵，因而具有溶菌的作用。當(dāng)溶液中pH小于8時，溶菌酶作用受到抑制。

　　葡萄糖：增加溶液的粘度，維持滲透壓，防止DNA受機(jī)械剪切力作用而降解。

　　EDTA：

　　(1)螯合Mg2 、Ca2 等金屬離子，抑制脫氧核糖核酸酶對DNA的降解作用(DNase作用時需要一定的金屬離子作輔基);

　　(2)EDTA的存在，有利于溶菌酶的作用，因為溶菌酶的反應(yīng)要求有較低的離子強(qiáng)度的環(huán)境。

在整個核酸檢測的過程中，zui大的挑戰(zhàn)是什么？

不是實驗室的負(fù)壓狀態(tài)，也不是全副武1裝的超負(fù)荷工作，訪問中工作人員不約而同地提到了一個詞：準(zhǔn)確。新型冠狀病毒檢測受到患者病程發(fā)展以及樣本采集等諸多因素的影響，每一個樣本都是一道待解的難題，需要排除各種干擾，才能找到準(zhǔn)確結(jié)果。為了確保檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性，只要檢測結(jié)果存疑，就必須再次復(fù)核，還可能要重新檢測。

醫(yī)學(xué)實驗室主要檢測的是血液樣本。醫(yī)學(xué)實驗室收到口岸送樣后，登記、編號、錄入信息，血常規(guī)檢測為自動化操作，每個樣本檢測時間為1分鐘，可實時獲得口岸現(xiàn)場被采樣入境人員的白細(xì)胞和淋巴細(xì)胞計數(shù)，作為新冠肺1炎的臨床表現(xiàn)判斷依據(jù)之一。衛(wèi)生檢疫綜合實驗室和醫(yī)學(xué)實驗室多種檢測方法同時檢測，綜合判斷，確保結(jié)果準(zhǔn)確性。

病毒核酸提取就像'針尖上跳舞'

檢驗的首要一步是病毒核酸提取，這也是zui危險的一步，需要在專門的生物安全二級實驗室里進(jìn)行。檢測人員要在清潔區(qū)穿戴兩套防護(hù)服、兩副乳膠手套，戴護(hù)目鏡，穿靴套，前后穿過6道門，才能到達(dá)核心實驗區(qū)，病毒核酸提取就像是“針尖上的舞蹈”?！懊看蚊撓路雷o(hù)服，衣服都濕透了。在2—4個小時的病毒核酸提取實驗過程中，一般都會安排兩人一組進(jìn)行檢驗，既是規(guī)定要求，也是防止工作人員在密閉的負(fù)壓實驗空間里出現(xiàn)意外。