高效液相色譜儀操作進(jìn)樣閥的問題

1、進(jìn)樣量的控制。

用進(jìn)樣閥來進(jìn)樣時(shí)，閥內(nèi)的樣品環(huán)是定量的，(一般分析型進(jìn)樣閥的樣品環(huán)體積為20ul)，由于進(jìn)樣時(shí)，注射到進(jìn)樣閥內(nèi)的樣品溶液在樣品環(huán)的管路中有徑向的速度梯度(即管軸處比管壁處的液流速度快)。因此，要想使樣品環(huán)中充滿樣品溶液，從而使用進(jìn)樣閥來準(zhǔn)確地定量，則必須使進(jìn)樣量大于樣品環(huán)體積的2倍。

2、進(jìn)樣閥的清潔問題。

如果樣品環(huán)中有上次進(jìn)樣時(shí)樣品的殘留，必然會污染下次注射進(jìn)的樣品，為防止這種現(xiàn)象的發(fā)生，應(yīng)按步驟操作。

3、進(jìn)樣閥溢流管的堵塞。

有時(shí)，進(jìn)樣閥的溢流管會發(fā)生堵塞現(xiàn)象，向進(jìn)樣閥內(nèi)注射樣品時(shí)，注射針推不動。此故障是由于溢流管的堵塞所致。堵塞的原因多半是由于溶解樣品的流動相用的是鹽溶液，而其中的鹽在溢流管的排空端口處結(jié)晶所致。此時(shí)，可用小燒杯盛少量蒸餾水對溢流管口稍加浸泡，端口處鹽的結(jié)晶就能被溶解掉，故障排除。如能在每次進(jìn)樣完成之后，用蒸餾水反復(fù)沖洗至溢流管中的鹽分全部沖出，則可避免此故障的發(fā)生。

HPLC分析流程圖

現(xiàn)代HPLC一般都做成一個(gè)個(gè)單元組件，然后根據(jù)分析要求將各所需單元組件組合起來。

基本的組件是高壓輸液泵、進(jìn)樣器、色譜柱、檢測器和數(shù)據(jù)系統(tǒng)(目前基本上為色譜工作站，記錄儀和積分儀已很少見)。

此外，還可根據(jù)需要配置流動相在線脫氣裝置、梯度洗脫裝置、自動進(jìn)樣系統(tǒng)、柱后衍生系統(tǒng)、樣品收集系統(tǒng)和全自動控制系統(tǒng)等。

HPLC的工作過程：輸液泵將流動相以穩(wěn)定的流速(或壓力)輸送至分析體系，在色譜柱之前通過進(jìn)樣器將樣品導(dǎo)入，流動相將樣品帶入色譜柱，在色譜柱中各組分因在固定相中的分配系數(shù)或吸附力大小的不同而被分離，并依次隨流動相流至檢測器，檢測到的信號送至數(shù)據(jù)系統(tǒng)記錄、處理以及保存。

液相色譜特點(diǎn)

液相色譜具有高分辨率、高靈敏度、速度快、色譜柱可反復(fù)利用，流出組分易收集等優(yōu)點(diǎn)，因而被廣泛應(yīng)用到生物化學(xué)、食品分析、環(huán)境分析、無機(jī)分析等各種領(lǐng)域。高效液相色譜儀與結(jié)構(gòu)儀器的聯(lián)用是一個(gè)重要的發(fā)展方向。液相色譜-質(zhì)譜連用技術(shù)受到普遍重視；液相色譜-紅外光譜連用也發(fā)展很快如在環(huán)境污染分析測定水中的烴類，海水中的不揮發(fā)烴類，使環(huán)境污染分析得到新的發(fā)展。使用高效液相色譜儀的領(lǐng)域很多，主要因?yàn)槠潇`敏度高、速度快等等優(yōu)點(diǎn)。高效液相色譜儀與結(jié)構(gòu)儀器的聯(lián)用是一個(gè)重要的發(fā)展方向。

液相色譜無壓力也無液體流過和解

液相色譜是利用混合物各組分在固定相和流動相中溶解、分配或吸附等化學(xué)作用性能的差異，使各組分在作相對運(yùn)動的兩相中反復(fù)多次受到上述各作用力而達(dá)到相互分離。高效液相色譜儀在食品分析、環(huán)境分析、生命科學(xué)、醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)和無機(jī)分析等領(lǐng)域得到廣泛使用。一般來說，80%～85% 的有機(jī)物原則上可采用高效液相色譜儀分析。