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傳統(tǒng)的微生物檢測實(shí)驗(yàn)室采取建造緩沖間,使實(shí)驗(yàn)室與外界隔離,在進(jìn)行實(shí)驗(yàn)操作時(shí)不受外界氣流的影響,使實(shí)驗(yàn)檢測不污染。但由于室內(nèi)空氣不流通,室內(nèi)空氣混濁,夏季工作室內(nèi)氣溫高,冬季室內(nèi)氣溫低,不但對微生物工作者的身體影響較大,而且還影響實(shí)驗(yàn)檢測。已設(shè)計(jì)出很有力的酶學(xué)方法用來消除一種形式的污染-使用UNG,這一技術(shù)能有效地消除由PCR產(chǎn)物引起的污染。近年來,室內(nèi)空調(diào)的使用,造成微生物實(shí)驗(yàn)室內(nèi)氣流混亂,直接影響檢測結(jié)果。因此,根據(jù)衛(wèi)生防疫系統(tǒng)的業(yè)務(wù)工作要求,設(shè)計(jì)能適應(yīng)無菌檢測,殺滅效果試驗(yàn),衛(wèi)生指標(biāo)檢測,病原體分離鑒定,流行病分子生物研究的微生物檢測潔凈實(shí)驗(yàn)室是必然趨勢,它不同于其他工業(yè)潔凈室,開展不同內(nèi)容的微生物檢測工作,均有特殊的要求。我們設(shè)計(jì)的微生物潔凈實(shí)驗(yàn)室,具備以下幾方面的要求。
1、潔凈室采用上送下回的氣流方式,層流罩送入100級潔凈風(fēng),環(huán)境送入1000級潔凈風(fēng),要求在層流罩隔離屏去掉情況下,工作臺面的100級潔凈度不受影響。室內(nèi)頂部四周不形成氣流死角。
5、在前PCR區(qū)建立PCR混合物。
⑴可以把即刻可用的'主混合物'溶液配好、分裝并保存在-20℃或4℃,在實(shí)驗(yàn)室只涉及到擴(kuò)增一種或少數(shù)幾種特異序列時(shí)這樣做很有用。⑵如果你的實(shí)驗(yàn)室使用多套引物,以致于配制包括所有試劑的單一反應(yīng)混合物不夠經(jīng)濟(jì),可以考慮分裝保存夠一天的PCR成分。⑶作為一個(gè)規(guī)則,應(yīng)該保存一套陰性、弱陽性和強(qiáng)陽性對照樣品來分析樣品配制和PCR前過程的效率和潔凈程度。潔凈室最關(guān)鍵之功效取決于操縱商品(如硅芯片等)所觸碰之空氣的潔凈度等級日及溫度濕度,使商品能在1個(gè)優(yōu)良之自然環(huán)境室內(nèi)空間中生產(chǎn)制造、生產(chǎn)制造,此室內(nèi)空間人們稱作潔凈室。而且,你也希望通過使用一個(gè)已知的弱陽性樣品來驗(yàn)證你的樣品緩沖液以證明里面不含擴(kuò)增抑制物。⑷陰性樣品要與每組樣品同時(shí)做,以分析是否存在樣品與樣品之間的污染以及是否存在PCR產(chǎn)物的污染,陰性對照應(yīng)該包括核酸以外的所有試劑。⑸當(dāng)做陽性對照時(shí),有兩個(gè)理由決定了應(yīng)該使用少數(shù)量的核酸。⑹由于必須有對照反應(yīng),對照模板的特點(diǎn)應(yīng)該予以考慮。