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山東富舜新材料科技有限公司座落在美麗的“泉城”濟南。考馬斯亮藍是一種陰離子染料,常用考馬斯亮藍G250和R250。公司是集化學科研、開發(fā)、生產(chǎn)、銷售、服務為一體的綜合型企業(yè)。我公司擁有先進的生產(chǎn)設備,完善的產(chǎn)品檢測手段和質(zhì)量保證體系。我公司的員工具有較強的責任感。經(jīng)過多年的發(fā)展,現(xiàn)已形成添加劑、阻燃劑、和化工助劑三大類上百個品種。公司本著“誠信經(jīng)營、專注品質(zhì)”的宗旨,參與到激烈的市場競爭中來,以好的產(chǎn)品質(zhì)量,優(yōu)惠的產(chǎn)品價格,令人滿意的銷售服務,贏得大家的支持與信賴。山東富舜新材料科技有限公司的誠信、實力和產(chǎn)品質(zhì)量獲得業(yè)界的認可。歡迎各界朋友蒞臨參觀、指導和業(yè)務洽談。
考馬斯亮藍G-250法測定蛋白質(zhì)含量的原理是什么
在酸性條件下,考馬斯亮蘭G-250染料與蛋白質(zhì)疏水區(qū)結(jié)合,導致da吸收峰由465 nm 變?yōu)?95 nm,同時顏色也由棕色變?yōu)樗{色,該藍色化合物顏色的深淺與蛋白質(zhì)濃度的高低成正比關(guān)系。該法操作簡便迅速,消耗樣品量少,但不同蛋白質(zhì)之間差異大,且標準曲線線性差。將蛋白質(zhì)樣品或稀釋的BSA 與Bradford試劑混合,測量在595 nm處的吸收值,在建立由一系列稀釋的BSA建立的標準曲線的情況下,蛋白質(zhì)的濃度可以根據(jù)標準曲線而確定。
考馬斯亮藍G-250(Coomassie brilliant blue G-250)測定蛋白質(zhì)含量屬于染料結(jié)合法的一種??捎糜赟DS-PAGE或非變性PAGE蛋白電泳的快速染色,或Western轉(zhuǎn)膜后PAGE膠上殘余蛋白的檢測。在游離狀態(tài)下呈紅色,da光吸收在488nm;當它與蛋白質(zhì)結(jié)合后變?yōu)榍嗌鞍踪|(zhì)-色素結(jié)合物在595nm波長下有da光吸收。其光吸收值與蛋白質(zhì)含量成正比,因此可用于蛋白質(zhì)的定量測定。蛋白質(zhì)與考馬斯亮藍G-250結(jié)合在2min左右的時間內(nèi)達到平衡,完成反應十分迅速;其結(jié)合物在室溫下1h內(nèi)保持穩(wěn)定。
該法是1976年Bradford建立,試劑配制簡單,操作簡便快捷,反應非常靈敏,靈敏度比Lowry法還高4倍,可測定微克級蛋白質(zhì)含量,測定蛋白質(zhì)濃度范圍為0~1 000μg/mL,xaio可測2.5μg/mL蛋白質(zhì),是一種常用的微量蛋白質(zhì)快速測定方法??捡R斯亮藍G250染色可以同時固定和染色,因此能立即觀察顯色結(jié)果,可用來確定電泳時間,觀察初步結(jié)果。
考馬斯亮藍有G250和R250兩種。其中考馬斯亮藍G250由于與蛋白質(zhì)的結(jié)合反應十分迅速,常用來作為蛋白質(zhì)含量的測定。考馬斯亮藍R250與蛋白質(zhì)反應雖然比較緩慢,但是可以被洗脫下去,所以可以用來對電泳條帶染色。
性狀亮藍為有金屬光澤的深紫色至青銅色顆?;蚍勰?,無臭。02mol/L乙suan銨溶液的最da吸收波長為630±2nm。易溶于水,水溶液呈亮藍色;可溶于乙醇、丙二醇和甘油。耐光性、耐熱性、耐酸性、耐鹽性和耐微生物性很好,耐堿性和耐氧化還原特性較佳。弱酸時呈青色,強酸時呈黃色,在沸騰堿液中呈紫色 [1] 。性能亮藍的色度極強,通常都是與其他食用著色劑配合使用,使用量小,在0.0005%~0.01%之間 [1] 。應用根據(jù)我國《食品添加劑使用衛(wèi)生標準》(GB2760-1996)中規(guī)定:亮藍可用于果味型飲料(液、固體)、果汁型飲料、汽水、配制酒、糖果、糕點上彩裝、紅綠絲、罐頭、濃縮果汁、青梅、對蝦片,使用量為0.025g/kg;冰淇淋,使用量為0.021999g/kg。紅綠絲的使用量可加倍;果味粉著色劑加入量按稀釋倍數(shù)的50%加入 [1] 。
純度試驗
(1)水不容物 小于0.20%。
(2)氯化物、硫酸鹽 以總量計,小于4.0%。
(3)重金屬 以Pb計,小于20ug/g。
(4 以As2O3計,小于4.0ug/g。
食用范圍及使用量
我國《食品添加劑食用衛(wèi)生標準》規(guī)定:可用于果汁飲料類、碳酸飲料、配制酒、糖果、糕點上彩妝;對檸檬酸、酒石酸、堿均穩(wěn)定、色澤鮮艷、調(diào)色自然、著色力強、色調(diào)不易受PH值影響。染色櫻桃罐頭、冰淇淋、冰棍、雪糕、果凍、油炸豆腐、膨化食品、風味酸奶、青梅、蝦片,使用量0.025g/kg;用于糖果包衣,用量為0.05g/kg;用于紅綠絲為0.10g/kg;用于固體飲料,0.2g/kg;用于綠芥末膏,0.01g/kg;用于可可玉米片,0.015g/kg
亮藍運用:
依據(jù)在我國《食用添加劑應用質(zhì)量標準》(GB2760-1996)中要求:亮藍可用作果味型飲料(液、固態(tài))、水果汁型飲料、碳酸飲料、配制酒、糖塊、點心上彩裝、紅綠絲、水果罐頭、濃縮汁、青梅、對蝦片,使用量為0.025g/kg;冰激凌,使用量為0.021999g/kg??捡R斯亮藍染色能力強,比色杯不洗干凈會影響光吸收值,不可用石英懷測定。紅綠絲的使用量可翻倍;果味粉添加劑添加量按稀釋液倍率的50%添加
依據(jù)在我國《食用添加劑應用質(zhì)量標準》(GB2760-1996)中要求:亮藍可用作果味型飲料(液、固態(tài))、水果汁型飲料、碳酸飲料、配制酒、糖塊、點心上彩裝、紅綠絲、水果罐頭、濃縮汁、青梅、對蝦片,使用量為0.025g/kg;冰激凌,使用量為0.021999g/kg。紅綠絲的使用量可翻倍;果味粉添加劑添加量按稀釋液倍率的50%添加