ELISA試劑盒的操作方法——間接法

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1.用包被緩沖液將已知抗原稀釋至1～10μg/ml，每孔加0.1ml，4℃過夜；

2.次日洗滌3次；

3.加一定稀釋的待檢樣品（未知）0.1ml于上述已包被之反應孔中,置37℃孵育1小時,洗滌；

4.（同時做空白、陰性及陽性孔對照）于反應孔中，加入新鮮稀釋的酶標第二（抗）0.1ml；

5.37℃孵育35-60分鐘，洗滌；

6.然后用DDW洗滌。

其余步驟同“雙夾心法”的4、5、6。

Elisa試劑盒原理及用途

本試劑盒采用間接競爭ELISA方法檢測肌肉組織、牛奶等樣品中的米松（Dexamethasone，DEX），試劑盒由預包被偶聯(lián)抗原的酶標板、酶標記物、、標準品及其他配套試劑組成。檢測時，加入標準品或樣品溶液，樣本中的米松藥品和酶標板上預包被偶聯(lián)抗原競爭抗米松藥類，加入酶標記物后，用TMB底物顯色，樣本吸光度值與其所含米松藥品含量成負相關(guān)，與標準曲線比較即可得出樣本中米松藥品的殘留量。

Elisa試劑盒技術(shù)原理

(1). 抗原或的固相化及抗原或的酶標記。

(2). 結(jié)合在固相載體表面a的抗原或仍保持其活性。

(3). 酶標記的抗原或既保留其活性，又保留酶的活性。

(4). 受檢標本與固相載體表面的抗原或起反應。再加入酶標記的抗原或，也通過反應而結(jié)合在固相載體上。

(5). 此時固相上的酶量與標本中受檢物質(zhì)的量呈一定的比例。

(6). 加入酶反應的底物后，底物被酶催化成為有色產(chǎn)物，產(chǎn)物的量與標本中受檢物質(zhì)的量直接相關(guān)，故可根據(jù)呈色的深淺進行定性或定量分析。測定方法具有很高的敏感度（pg-ng/ml水平），并且重復性好。以反應為基礎(chǔ)，將抗原、的特異性反應與酶對底物的有效催化作用相結(jié)合起來的一種敏感性很高的試驗技術(shù)。