液相色譜儀

洗脫系統(tǒng)：

分等度洗脫和梯度洗脫

等度洗脫：流動(dòng)相比例保持不變

梯度洗脫系統(tǒng)：流動(dòng)相比例隨時(shí)間變化高壓梯度洗脫系統(tǒng)低壓梯度洗脫系統(tǒng)梯度洗脫主要是優(yōu)化色譜條件，達(dá)到好的分離。

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液相色譜法概述

液相色譜法(HPLC)是上個(gè)世紀(jì)七十年代迅速發(fā)展起來(lái)的一項(xiàng)、快速的分析分離技術(shù)，是現(xiàn)代分離測(cè)試的重要手段。色譜法的分離原理是：溶于流動(dòng)相(mobile phase)中的各組分經(jīng)過(guò)固定相時(shí)，由于與固定相(station phase)發(fā)生作用(吸附、分配、排阻、親和)的大小、強(qiáng)弱不同，在固定相中滯留時(shí)間不同，從而先后從固定相中流出。又稱(chēng)為色層法、層析法。

液相色譜

HPLC對(duì)流動(dòng)相的一般要求

流動(dòng)相就比如人體的血液，其質(zhì)量直接影響到整個(gè)系統(tǒng)的正常運(yùn)行與否。

應(yīng)該使用HPLC級(jí)的溶劑，不能互相混溶的溶劑不可以直接切換!一般在水相和與其不混溶的溶劑切換時(shí)，使用異作為過(guò)渡溶劑。

注意溶劑的截止波長(zhǎng)。截止波長(zhǎng)是指該溶劑可以在紫外檢測(cè)器中使用的低波長(zhǎng),低于該波長(zhǎng)后,溶劑會(huì)有很強(qiáng)的紫外吸收，從而影響極限的穩(wěn)定性、干擾對(duì)所分析物質(zhì)的檢測(cè)。

HPLC所使用的水必須是新鮮的和經(jīng)過(guò)0.45μm濾膜過(guò)濾過(guò)的。建議每天更換新鮮的水。長(zhǎng)期不用時(shí)，必須把使用水的管路用置換，防止長(zhǎng)霉。

儀器使用完后要采用適當(dāng)?shù)娜軇_洗等方法維護(hù)色譜柱和系統(tǒng)。如果使用了緩沖鹽一定先將鹽要沖洗干凈。

儀器長(zhǎng)期不用時(shí)，不建議使用純封存。因?yàn)橛猩删酆衔锏内厔?shì)。建議使用、/水或/水封存。

當(dāng)有流路堵塞時(shí)，可以嘗試將之反接后沖洗。污染的溶劑或溶劑瓶里的藻類(lèi)生長(zhǎng)將會(huì)縮短溶劑過(guò)濾器的使用壽命，并且影響泵和系統(tǒng)的的性能。這在水溶劑或磷酸鹽緩沖液(pH 4 至7) 中尤其如此。

液相色譜常見(jiàn)問(wèn)題

在日常工作中，遇見(jiàn)液相色譜儀哪些異常情況？又是如何解決的？

峰的問(wèn)題：峰前沿，峰重疊，峰拖尾，鬼峰，基線(xiàn)漂移。

壓力問(wèn)題：超壓，低壓，壓力波動(dòng)。

硬件問(wèn)題：日常損耗，零件損壞。

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