物質(zhì)對光的選擇性吸收波長，以及相應的吸收系數(shù)是該物質(zhì)的物理常數(shù)。當已知某純物質(zhì)在一定條件下的吸收系數(shù)后,可用同樣條件將該供試品配成溶液，測定其吸收度,即可由上式計算出供試品中該物質(zhì)的含量。在可見光區(qū)，除某些物質(zhì)對光有吸收外，很多物質(zhì)本身并沒有吸收,但可在一定條件下加入顯色試劑或經(jīng)過處理使其顯色后再測定,故又稱比色分析。由于顯色時影響呈色深淺的因素較多，且常使用單色光純度較差的儀器，故測定時應用標準品或?qū)φ掌吠瑫r操作。

紫外和可見光分光光度計

通常包括 5個基本組成部分。①穩(wěn)定的光源：在可見光區(qū)用白熾光源，如鎢絲燈或碘鎢燈，紫外區(qū)用低壓氫或放電燈。②色散器：有的儀器用棱鏡或光柵（見光柵測長技術），簡單儀器可用濾光片。③試液槽：透明的（如石英玻璃皿）容器，用以盛放試樣。④檢測器：將吸光度或透射率轉(zhuǎn)變?yōu)橐诇y的電量。⑤記錄顯示儀：用以記錄光譜圖或顯示吸光度。

分光光度計采用一個可以產(chǎn)生多個波長的光源，通過系列分光裝置，從而產(chǎn)生特定波長的光源，光線透過測試的樣品后，部分光線被吸收，計算樣品的吸光值，從而轉(zhuǎn)化成樣品的濃度。分光光度計作為一種精密儀器，在運行工作過程中由于工作環(huán)境，操作方法等種種原因，其技術狀況必然會發(fā)生某些變化，可能影響設備的性能，甚至誘發(fā)設備故障及事故。分光光度計的使用事項：比色杯必須配套使用，否則將使測試結果失去意義。在進行每次測試前均應進行比較。