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發(fā)布時(shí)間:2021-01-01 04:15  






實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的抓取和固定

在進(jìn)行實(shí)驗(yàn)時(shí),為了不損傷動(dòng)物的健康,不影響觀察指標(biāo),并防止被動(dòng)物咬傷,首先要限制動(dòng)物的活動(dòng),使動(dòng)物處于安靜狀態(tài),工作人員必須掌握合理的抓取固定方法。抓取動(dòng)物前,必須對(duì)各種動(dòng)物的一般習(xí)性有所了解。操作時(shí)要小心仔細(xì)、大膽敏捷、熟練準(zhǔn)確、不能粗暴,不能恐嚇動(dòng)物,同時(shí),要愛惜動(dòng)物,使動(dòng)物少受痛苦。觀察大鼠注射尼古J期間和戒斷后體重變化,存活情況和古丁戒斷評(píng)分另外選取Control組NS組和NT9組各6只大鼠測(cè)定右下肢足底MWT和TWL。





實(shí)驗(yàn)動(dòng)物各種體液、的采集方法


消化液的采集

(一) 唾液

1. 直接抽取法 在急性實(shí)驗(yàn)中, 可用吸管直接插入動(dòng)物口腔或唾液腺導(dǎo)管抽吸唾液,此法非常簡(jiǎn)單,但從口腔抽吸唾液會(huì)有雜質(zhì)混入。

2. 制造腮腺瘺法 在慢性實(shí)驗(yàn)中,收集狗的唾液,要用手術(shù)方法將腮腺導(dǎo)管開口移向體外,即以腮腺導(dǎo)管為中心,切成一直徑約2~3cm的圓形粘膜片,將此粘膜片,與周圍組織分開,穿過皮膚切口引到頰外,將帶有導(dǎo)管開口的粘膜片與周圍的皮膚縫合,腮腺分泌的唾液就流出頰外。這種方法可以收集到較純凈的唾液。切除之shen組織稱重,以右shen重量減去所切除的左shenshen組織重量來間接估算殘余shen重量,并算出切除率。

(二)胃液

1. 直接收集胃液法 急性實(shí)驗(yàn)時(shí),先將動(dòng)物,將插胃管經(jīng)口插入胃內(nèi),在灌胃管的出口連一,用此可收集到胃液,此法適用于狗等大型動(dòng)物。如是大鼠,需手術(shù)剖腹,從幽門端向胃內(nèi)插入一塑料管,再由口腔經(jīng)食道將一塑料管插入前胃,用pH7.5、35℃左右的生理鹽水,以12ml/h的流速灌胃,收集流出液,進(jìn)行分析。將幾種不同的應(yīng)激因子在實(shí)驗(yàn)全程中應(yīng)用,順序隨機(jī),使動(dòng)物不能預(yù)料刺激的發(fā)生。

2. 制備胃瘺法 在慢性實(shí)驗(yàn)中,收集胃液多用胃瘺法,如全胃瘺法、巴氏小胃瘺法、海氏小胃瘺法等。制備小胃是將動(dòng)物的胃分離出一小部分,縫合起來形成小胃,主胃與小胃互不相通,主胃進(jìn)行正常消化,從小胃可收集到純凈的胃液。應(yīng)用該法,可以待動(dòng)物恢復(fù)健康后,在動(dòng)物清醒狀態(tài)下反復(fù)采集胃液。在一些特殊的實(shí)驗(yàn)中,如進(jìn)行尾靜脈注射時(shí),可使用特殊的固定裝置進(jìn)行固定,如尾靜脈注射架或粗的玻璃試管。

(三)胰液和膽汁

在動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中,主要是通過對(duì)胰總管和膽總管的插管而獲得胰液或膽汁。狗的胰總管開口于十二指腸降部,在緊靠腸壁處切開胰管,結(jié)扎固定并與導(dǎo)管相連,即可見無色的胰液流入導(dǎo)管。大鼠的胰管與膽管匯集于一個(gè)總管,在其入腸處插管固定,并在近肝門處結(jié)扎和另行插管,可分別收集到胰液和膽汁。百奧賽圖利用自主開發(fā)制備的B-h17A人源化小鼠(敲除小鼠IL-17A基因,同時(shí)敲進(jìn)人IL-17A基因)為針對(duì)人IL-17A靶點(diǎn)的MSzhi療yao效研究提供了一個(gè)可靠的MOG誘導(dǎo)的EAE模型。

有時(shí)也可通過制備胰瘺和膽囊瘺來獲得胰液和膽汁。




大鼠癲xian模型

利用yao物制備癲xian模型(yao物建模)

注射yao物,通過破壞腦部神經(jīng)遞質(zhì)釋放的平衡,阻斷興奮性氨基酸的循環(huán)通路,誘發(fā)dian癇發(fā)生。

1注射合成紅藻氨酸制備大鼠dian癇模型紅藻氨酸(kainic acidKA)是海藻的提取物,可作用于脊椎動(dòng)物zhong樞神經(jīng)系統(tǒng)的谷氨酸

受體,可直接興奮神經(jīng)元,又可增強(qiáng)鈉離子的通透性而使神經(jīng)細(xì)胞去極化,誘dian癰發(fā)生。KA的人工合成品即合成紅藻氨酸( synthetical kainic acid,SKA) 腹腔注射。發(fā)作階段性明顯,行為學(xué)表現(xiàn)規(guī)律、穩(wěn)定,si亡率低,適宜大規(guī)模建模。例如誘發(fā)動(dòng)脈粥樣硬化時(shí),草食類動(dòng)物兔需要的膽固醇劑量比人高得多,而且病變部位并不出現(xiàn)在主動(dòng)脈弓。

2.注射氯化鋰_.匹羅卡品致大鼠癲xian模型近年來一直被認(rèn)為是研究顳葉dian癇的理想模型。

3.穿刺注射海人酸杏仁核點(diǎn)燃大鼠癲xian模型

4.急性氯化鐵dian癇模型

5.青mei素點(diǎn)燃模型

6.戍四唑點(diǎn)燃模型

類似人類失神癲xian特征,

7.戊si氮(PIZ)誘導(dǎo)的急、慢性癲xian

8.杏仁核點(diǎn)刺激點(diǎn)燃模型電極植入, 給予連續(xù)電剌激。

9.經(jīng)眼電刺激大鼠癲xian模型






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