等溫核酸試劑盒

RNA試劑盒使用方法

使用時(shí)一定要根據(jù)自己的實(shí)驗(yàn)需要購買提取試劑盒， 如果不是試劑盒，或許能提出RNA，但不能確保其質(zhì)量以及完整性，會(huì)影響RT-PCR、Northern blot、Dot blot、Real time RT PCR、芯片分析、polyA 篩選、體外翻譯、RNase 保護(hù)分析等后續(xù)實(shí)驗(yàn)的結(jié)果。

當(dāng)前提取效果好的是QIANGEN公司生產(chǎn)的RNA提取試劑盒，但其售價(jià)較高，單次實(shí)驗(yàn)費(fèi)用花費(fèi)太大，對(duì)精度要求不高的實(shí)驗(yàn)沒有必要購買，當(dāng)然還有其它的進(jìn)口試劑盒，但是均存在價(jià)格高、訂貨周期長的問題（如果碰上國內(nèi)無貨的時(shí)候，要從國外發(fā)貨，會(huì)等很長一段時(shí)間）。普通的提取實(shí)驗(yàn)用國產(chǎn)的試劑盒就足以，價(jià)格不高，基本上各地均有現(xiàn)貨，如天根（目前國內(nèi)生產(chǎn)的試劑盒中銷售面比較廣的一種）等，其價(jià)格比進(jìn)口試劑盒要便宜許多，且效果還不錯(cuò)，還可以。

當(dāng)然，就RNA的提取而言，不一定試劑盒的提取效果就非常好，其實(shí)采用一些經(jīng)典的RNA提取方法，效果也很不錯(cuò)，如：TRIZOL、EDTA等，只是試劑盒使用方便，經(jīng)典的方法操作復(fù)雜一些。

重組酶聚合酶擴(kuò)增技術(shù)（RPA)是2006年由英國科學(xué)家研發(fā)的一種核酸恒溫?cái)U(kuò)增技術(shù)。它是利用多種酶參與，在體外模擬生物體內(nèi)DNA復(fù)印，恒溫條件下短時(shí)間內(nèi)實(shí)現(xiàn)靶基因大量擴(kuò)增，既可以擴(kuò)增DNA，也可以擴(kuò)增RNA。RPA技術(shù)具有恒溫、快速、便攜、靈敏度高、特異性強(qiáng)和操作簡單等優(yōu)點(diǎn)，是目前很有望替代PCR技術(shù)的核酸等溫?cái)U(kuò)增方法，在基層現(xiàn)場診斷中，具有廣闊的應(yīng)用前景。

相對(duì)來說RPA是很好的恒溫?cái)U(kuò)增法，可在較低溫下恒溫?cái)U(kuò)增，不需要復(fù)雜儀器設(shè)備，操作簡單、反應(yīng)時(shí)間短，特異性好、靈敏度高，可采用電泳、熒光、側(cè)向流試紙等多種方式檢測(cè)擴(kuò)增產(chǎn)物

目前市場上各家生物企業(yè)研發(fā)出的核酸檢測(cè)試劑盒已經(jīng)超過100種，但由于缺乏RNA標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)，無法對(duì)檢測(cè)方法進(jìn)行量值傳遞和對(duì)試劑盒檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確度進(jìn)行評(píng)價(jià)，好的國產(chǎn)試劑盒競爭力也無法得到證明。為此，急需研制RNA標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)來評(píng)價(jià)這些病毒核酸檢測(cè)試劑盒的質(zhì)量和準(zhǔn)確度，為試劑盒檢測(cè)結(jié)果的判定提供準(zhǔn)繩。