科學(xué)家在培養(yǎng)轉(zhuǎn)0基因植物時(shí)，常用什么中的質(zhì)粒作為載體？

（1）具有較小的分子量。經(jīng)驗(yàn)表明，為了避免在DNA的純化過(guò)程中發(fā)生鏈的斷裂，克1隆載體的分子大小建議不要超過(guò)10Kb。pBR質(zhì)粒這種小分子量的特點(diǎn)，不僅易于自身DNA的純化，而且可容納較大的外源DNA部分片段；

（2）具有兩種抗1菌素抗性基因可供作轉(zhuǎn)化子的選擇記號(hào)，能指示載體或重組DNA分子是否進(jìn)入宿主細(xì)胞以及外源DNA分子是否插入載體分子形成了重組子。標(biāo)記基因往往可以賦予宿主細(xì)胞一種新的表型，這種轉(zhuǎn)化細(xì)胞可明顯地區(qū)別于非轉(zhuǎn)化細(xì)胞。當(dāng)我們把一個(gè)DNA部分片段插入到某一個(gè)標(biāo)記基因內(nèi)時(shí)，該基因就失去了相應(yīng)的功能。當(dāng)把這種重組DNA分子轉(zhuǎn)到宿主細(xì)胞后，該基因原來(lái)賦予的表型也就消失了。要是仍保留了原來(lái)表型的轉(zhuǎn)化細(xì)胞，細(xì)胞內(nèi)含有的DNA分子一定不是重組子。很顯然，既要指示外源DNA是否進(jìn)入了宿主細(xì)胞，又要指示載體DNA分子中是否插入了外源DNA部分片段，那么這種載體必須至少具有兩個(gè)標(biāo)記基因。另外，pBR質(zhì)粒載體還具較高的拷貝數(shù)，而且經(jīng)過(guò)氯霉1素?cái)U(kuò)增之后，每個(gè)細(xì)胞中可積累1000~3000個(gè)拷貝，這就為重組體DNA的制備提供了極大的方便。

腺病毒的基因組

腺病毒的基因組以線性的雙鏈DNA形式存在，由蛋白VII和一種稱(chēng)為mu的小蛋白緊密地環(huán)繞在其周?chē)?，起到?lèi)組蛋白樣的作用。另一種蛋白V將這種DNA-蛋白復(fù)合物連接起來(lái)，并通過(guò)蛋白VI與病毒衣殼連接在一起。在兩條鏈的5′端各以共價(jià)鍵結(jié)合著一個(gè)被稱(chēng)為DNA末端蛋白（pTP）復(fù)合物（DNA-TPC）的特化的結(jié)構(gòu)，與腺病毒copy密切相關(guān)。腺病毒基因組的兩端各有一段100bp的反向末端重復(fù)序列（ITR），是copy的起始位點(diǎn)。在左端ITR的3′側(cè)有一段長(zhǎng)約300bp的包裝信號(hào)（ψ）介導(dǎo)腺病毒基因組包裝入病毒衣殼。對(duì)腺病毒而言，只有包括兩端的ITR和包裝信號(hào)（ψ）的約0.5kb的序列是順式作用元件，也就是說(shuō)必須由腺病毒載體自身攜帶，而其他的30余種蛋白都可以通過(guò)輔助病毒（或細(xì)胞）反式補(bǔ)足。

基因?qū)爰?xì)胞常用方法

轉(zhuǎn)染

　 重組的噬菌體DNA也可象質(zhì)粒DNA的方式進(jìn)入宿主菌，即宿主菌先經(jīng)過(guò)CaCl2，電穿孔等處理成感受態(tài)細(xì)菌再接受DNA，進(jìn)入感受態(tài)細(xì)菌的噬菌體DNA可以同樣copy和繁殖，這種方式稱(chēng)為轉(zhuǎn)染（transfection）。M13噬菌體DNA導(dǎo)入大腸桿1菌就常用轉(zhuǎn)染的方法。重組DNA進(jìn)入宿主細(xì)胞也常用轉(zhuǎn)染方式。zui經(jīng)典的是1973年建立的磷酸鈣法，其利用的基本現(xiàn)象是：DNA如以磷酸鈣-DNA共沉淀物形式出現(xiàn)時(shí)，培養(yǎng)細(xì)胞攝取DNA的效率會(huì)顯著提高。用電穿孔法處理培養(yǎng)的哺乳類(lèi)細(xì)胞也能提高細(xì)胞攝取DNA能力，但所用外加電場(chǎng)的強(qiáng)度、電脈沖的長(zhǎng)度等條件與處理細(xì)菌者都很不相同。用人工脂質(zhì)膜包裹DNA，形成的脂質(zhì)體可以通過(guò)與細(xì)胞膜融合而將DNA導(dǎo)入細(xì)胞，方法簡(jiǎn)單而有效，但缺點(diǎn)是有細(xì)胞毒性和血1清的不親和性，近年來(lái)人們發(fā)現(xiàn)了一種更為有效的轉(zhuǎn)染試劑－陽(yáng)離子聚合物，其克服了脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染試劑細(xì)胞毒性大，在體內(nèi)易被血1清清除等缺點(diǎn)，具有轉(zhuǎn)染效率1高，操作簡(jiǎn)單而日益受到重視。

20世紀(jì)50年代以后，隨著分子遺傳學(xué)的發(fā)展，尤其是沃森和克里克提出DNA雙螺旋結(jié)構(gòu)以后，人們進(jìn)一步認(rèn)識(shí)了基因的本質(zhì)，即基因是具有遺傳效應(yīng)的DNA。研究結(jié)果還表明，每條染色體只含有1～2個(gè)DNA分子，每個(gè)DNA分子上有多個(gè)基因，每個(gè)基因含有成百上千個(gè)脫氧核苷酸。自從RNA病毒發(fā)現(xiàn)之后，基因的存在方式不僅僅只存在于DNA上，還存在于RNA上。由于不同基因的脫氧核糖核苷酸的排列順序（堿基序列）不同，因此，不同的基因就含有不同的遺傳信息。1994年中科院曾邦哲提出系統(tǒng)遺傳學(xué)概念與原理，探討貓之為貓、虎之為虎的基因邏輯與語(yǔ)言，提出基因之間相互關(guān)系與基因組邏輯結(jié)構(gòu)及其程序化表達(dá)的發(fā)生研究。