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所謂大腸菌群,是指在37℃培養(yǎng)24h 內(nèi)能發(fā)酵乳糖產(chǎn)酸、產(chǎn)氣的兼性厭氧的革藍(lán)氏陰性無芽孢桿菌的總稱。主要由腸桿菌科中四個(gè)屬內(nèi)的細(xì)菌組成,即埃希氏桿菌屬、檸檬酸桿菌屬、克雷伯氏菌屬和腸桿菌屬。
水的大腸菌群數(shù)是指100 mL水檢樣內(nèi)含有的大腸菌群實(shí)際數(shù)值,以大腸菌群近似數(shù)(MPN)表示。在正常情況下,腸道中主要有大腸菌群、糞鏈球菌和厭氧芽孢桿菌等多種細(xì)菌。這些細(xì)菌都可以隨人畜排泄物進(jìn)入水源,由于大腸菌群在腸道內(nèi)數(shù)量多,所以,水源中大腸菌群的數(shù)量,是直接反映水源被人畜排泄物污染的一項(xiàng)重要指標(biāo)。目前,國際上已公認(rèn)大腸菌群是糞便污染的指標(biāo)。因而對(duì)飲用水必須進(jìn)行大腸菌群的檢查。
水中大腸菌群的檢測方法,常用多管發(fā)酵法和濾膜法。多管發(fā)酵法可適用于各種水樣的檢驗(yàn),但操作繁瑣,需要的時(shí)間較長。濾膜法僅適用于自來水和深井水,操作簡單、快速,但不適用于雜質(zhì)較多、易于堵塞濾孔的水樣。
水中糞大腸菌群的常見檢測方法
1、聚合酶鏈?zhǔn)郊夹g(shù)
提取糞大腸菌群混懸液和待測水樣的DNA,利用PCR技術(shù)擴(kuò)增編碼約260bp的LacZ基因(β-半乳糖苷酶基因)和約150BP的UdiA基因(β-D-半乳糖苷酶基因)的DNA,分別檢測大腸菌群數(shù)和大腸桿菌。
2、熒光原位雜交技術(shù)
由于糞大腸菌群特異的DNA序列,借助熒光標(biāo)記的特異寡聚核苷酸片段作為的探針與待測水樣中的DNA分子雜交,將雜交細(xì)胞經(jīng)熒光檢測體系在鏡下對(duì)待測DNA進(jìn)行定性、定量分析,確定菌群數(shù)。
大腸桿菌平板計(jì)數(shù)法檢測步驟如下:
1、制備樣品稀釋液,吸取1mL加入到平板中,傾注55度左右的已滅菌的VRBA瓊脂15-20mL,凝固后36度24小時(shí)培養(yǎng),計(jì)數(shù)紫紅色菌落
2、再將合適稀釋度的VRBA平板上的紫紅色菌落轉(zhuǎn)接10支BGLB,統(tǒng)計(jì)陽性率
3、再將計(jì)數(shù)的VRBA結(jié)果X陽性率X稀釋度,就是zui終結(jié)果。
程控定量封口機(jī)主要用于水樣中的綠膿假單胞菌群、腸球菌、總大腸菌群和糞大腸桿菌、大腸埃希菌、菌落總數(shù)的快速檢測、可野外攜帶、應(yīng)急、定量檢測。
符合《GB5749-2006生活飲用水標(biāo)準(zhǔn)》
符合《GB/T5750.12-2006生活飲用水標(biāo)準(zhǔn)檢驗(yàn)方法》
符合《CJ/T206—2005城市供水水質(zhì)標(biāo)準(zhǔn) 》
符合《GB3838-2002,地表水環(huán)境質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)》
符合《GB/T 14848-93地下水質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)》
符合《GB 9667-1996,游泳場所衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)》
符合《WHO, EPA,wastewater Rule 40 CFR Part 136.3》
符合《DB21/T2368-2014海水中總大腸菌群和糞大腸菌群快速測定 酶底物法》
酶底物法檢測系統(tǒng)由程控定量封口機(jī)、51或97孔定量檢測盤、100mL定量瓶、酶底物法檢測試劑四部分組成,檢測水樣范圍:飲用水、源水、瓶裝水、中水、二次供水、管網(wǎng)水、廢水、食品水、畜牧用水等。