ELISA試劑盒——ELISA實(shí)驗(yàn)通用規(guī)則

1、溫浴時，要用不干膠或膠帶紙封好酶標(biāo)板，防止水分的蒸發(fā)。

Elisa試劑盒的優(yōu)點(diǎn)

1．特異性強(qiáng)：不與其它細(xì)胞反應(yīng)。

2．重復(fù)性好：板內(nèi)、板間變異系數(shù)均小于10%。

3．穩(wěn)定性高：實(shí)驗(yàn)效果很穩(wěn)定。

4．超靈敏度：zui小的檢測濃度小于1號標(biāo)準(zhǔn)品，稀釋度和樣品線性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù)R值為0.990。

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Elisa試劑盒——Elisa實(shí)驗(yàn)常見問題及解決方案

背景深，全部呈有色（通常的Elisa背景值OD<0.2） 

1  洗滌不充分，洗后未拍干，樣品中其它成分殘留或酶標(biāo)記物殘留 洗液準(zhǔn)確配制；充分洗滌，靜置15秒，徹底拍干。加樣或加酶拍板的濾紙應(yīng)棄去不用，不要反復(fù)使用，否則易造成污染。

2  底物污染，未避光保存，出現(xiàn)顏色 棄去底物，重新配置

3  樣品稀釋液污染 棄去稀釋液，重新配置

4  吸頭重復(fù)使用，未洗凈或消毒不徹底 吸頭盡可能一次性使用

5  不正確的孵育時間，溫度（尤其是底物孵育的時間） 常用的溫育溫度有37℃和室溫，其次是43℃和2～8℃。完全按照說明書要求。

6  偶聯(lián)抗體（streptavidin-HRP）濃度過高 按照說明書調(diào)整到合適的濃度

7  ELISA板子不正確的貯存 酶標(biāo)板貯存于2-8 ℃；使用結(jié)合力低點(diǎn)的Elisa板

8  沒有正確封閉 在標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液中加入動物蛋白或延長封閉時間

9  樣本溶血嚴(yán)重 建議使用非溶血或輕微溶血樣本，嚴(yán)重溶血樣本會導(dǎo)致背景偏高。