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細(xì)胞檢測服務(wù)
作為生物體結(jié)構(gòu)和功能的基本單位,細(xì)胞在機體的各項新陳代謝的生命活動中發(fā)揮著重要的作用,與此同時,細(xì)胞的生理過程,在一定程度上也是機體生命活動的反應(yīng)。因此利用多種精密儀器,結(jié)合特異性的檢測試劑,對體外培養(yǎng)的細(xì)胞直接檢測其增殖的基本過程,或?qū)?xì)胞進行不同的處理后檢測細(xì)胞生活周期內(nèi)各項指標(biāo)的變化,從而深入揭示細(xì)胞新陳代謝的具體機制。自噬形成時,GFP-LC3融合蛋白轉(zhuǎn)位至自噬體膜,在熒光顯微鏡下形成多個明亮的綠色熒光斑點,一個斑點相當(dāng)于一個自噬體,可以通過計數(shù)來評價自噬活性的高低。
細(xì)胞培養(yǎng)中常見的污染及解決方法
原生動物污染
原生動物污染后,細(xì)胞培養(yǎng)基變得輕微渾濁。在顯微鏡下,大量的小點來回移動。雖然此時細(xì)胞仍能生長,但繁殖速度減慢,細(xì)胞生長狀態(tài)不好,邊緣不清,變得不透明。原生動物與細(xì)胞形成共生關(guān)系。同時,原生動物與細(xì)胞競爭營養(yǎng)。破骨細(xì)胞標(biāo)志基因TRAP在共培養(yǎng)3天時開始表達(dá),而MMP-9和CathepsinK則在共培養(yǎng)5天后表達(dá)結(jié)論共培養(yǎng)體系中成骨細(xì)胞對破骨細(xì)胞調(diào)控作用顯著誘導(dǎo)的破骨細(xì)胞具有噬骨能力,該共培養(yǎng)模型可用于成骨細(xì)胞和破骨細(xì)胞之間的相互調(diào)控作用研究。這種共生現(xiàn)象非常普遍,但以細(xì)胞為主,因為原生動物的數(shù)量相對較少,因而對細(xì)胞的正常生長沒有影響,只有當(dāng)它們達(dá)到一定數(shù)量時,才終爆發(fā)成為循環(huán)。
解決方法:原生動物污染的原因有很多,如液體消毒問題、操作問題、環(huán)境問題等,如果細(xì)胞足夠,果斷丟棄被污染的細(xì)胞和復(fù)蘇細(xì)胞。如果要保留,需要購買使用相關(guān)的滅菌試劑。
選擇實驗外包公司需要注意哪些事項?
技術(shù)支持
盡量有專門的技術(shù)負(fù)責(zé)對接項目,或者有技術(shù)服務(wù)群。隨時溝通項目問題,定期匯報實驗進展。這樣能把控實驗進度,結(jié)果數(shù)據(jù)有疑問也可以交流,不要實驗做完就沒人管了。
實驗數(shù)據(jù)
明確提供實驗原始數(shù)據(jù)、原始圖片,并有保密協(xié)議不外傳數(shù)據(jù)和客戶的信息。確保實驗結(jié)果的完整性、唯獨性、真實性。這也是找實驗外包很關(guān)心的原則。另外結(jié)果盡量有實驗報告形式,包含所用材料、實驗步驟和結(jié)果統(tǒng)計分析,方便寫文章時直接使用。另外實驗都是有不確定性的,如果外包公司能保證一定能做出預(yù)期的結(jié)果,那多半是不靠譜的。2%的瓊脂糖和2xDMEM培養(yǎng)基(含有2x和20%的小牛血l清)混合后,取3mL混合液注入直徑6cm平皿中(10cm平皿加7~10mL),冷卻凝固,可作底層瓊脂置CO2溫箱中備用。做實驗不怕出問題,的外包公司會負(fù)責(zé)到底,有問題反饋再處理就好。