40只肥胖敏感大鼠按體重隨機(jī)分為4組，分別為模型對(duì)照組和三劑量組。每周記錄喂食量、灑食量、剩食量，安徽動(dòng)物模型，稱體重1次。模型對(duì)照組及三個(gè)劑量組給予高熱量模型飼料，空白對(duì)照組給予維持飼料。各劑量組給予不同劑量的供試品灌胃，模型對(duì)照組和空白對(duì)照組給予等量的相應(yīng)溶劑，供試品給藥時(shí)間為6周，但不超過(guò)10周.試驗(yàn)結(jié)束后，稱體重，ma醉，動(dòng)物模型公司，解剖shen臟周圍的脂肪和gao丸周圍的脂肪，稱重，計(jì)算體脂比。




ROS是什么？

ROS也就是活性氧（reactive oxygen species，ROS）指來(lái)源于氧的自由基和非自由基。ROS在細(xì)胞生命，應(yīng)激和si亡中具介導(dǎo)作用，并且不同濃度的ROS在其中起著截然不同的作用，從而導(dǎo)致細(xì)胞命運(yùn)的不同。因此對(duì)ROS的濃度或相對(duì)水平進(jìn)行可靠的測(cè)量非常有必要。

實(shí)驗(yàn)儀器和材料

細(xì)胞培養(yǎng)基

胎牛xue清

青mei素/鏈mei素

胰酶

PBS

DMSO

活性氧（ROS）試劑盒

血球計(jì)數(shù)板

CO2培養(yǎng)箱

倒置熒光顯微鏡

實(shí)驗(yàn)步驟

1、細(xì)胞傳代培養(yǎng)：當(dāng)細(xì)胞長(zhǎng)至80-90%時(shí)，去除培養(yǎng)基，加入PBS洗1-2次，去除PBS后，加入1ml胰酶消化1-3min后，加入3ml完全培養(yǎng)基中和胰酶終止消化，將消化的細(xì)胞轉(zhuǎn)移至15ml離心管中，1000rpm離心5min。倒掉上清后，加入3ml培養(yǎng)基重懸細(xì)胞，1:3傳代至培養(yǎng)皿中培養(yǎng)。

2、將長(zhǎng)到培養(yǎng)皿80%-90%的內(nèi)皮細(xì)胞用胰酶消化下來(lái)，1000rpm離心，去除上清，加入完全培養(yǎng)基重懸細(xì)胞，將細(xì)胞分別種在6孔板中，每孔種1×106個(gè)細(xì)胞。3、待細(xì)胞貼壁后，使用不同的含藥xue清的培養(yǎng)基培養(yǎng)細(xì)胞。3、待細(xì)胞貼壁后，使用不同的含藥xue清的培養(yǎng)基培養(yǎng)細(xì)胞。4、48h后，加入DCFH-DA于培養(yǎng)基中，稀釋倍數(shù)為1:1000。5、孵育1h后，直接將細(xì)胞置于熒光顯微鏡下拍照。

實(shí)驗(yàn)結(jié)果

掃描電鏡（Scanning Electron Microscope，SEM）是一種利用電子束與樣品相互作用產(chǎn)生的信號(hào)來(lái)觀察樣品表面的形貌、結(jié)構(gòu)和成分的高分辨率的顯微鏡技術(shù)。它與傳統(tǒng)的光學(xué)顯微鏡和透射電子顯微鏡相比，動(dòng)物行為學(xué)，具有許多優(yōu)勢(shì)，如景深長(zhǎng)、視野大、樣品制備簡(jiǎn)單、分辨本領(lǐng)高、綜合分析能力強(qiáng)等。掃描電鏡已廣泛應(yīng)用于材料學(xué)、物理學(xué)、化學(xué)、生物學(xué)、考古學(xué)、地礦學(xué)、微電子工業(yè)等領(lǐng)域，對(duì)于探索微觀世界和分析細(xì)微細(xì)節(jié)有重要的意義。


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