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黃曲霉素M1檢測試劑盒酶聯(lián)免疫試驗步驟
將所需試劑從4℃冷藏環(huán)境中取出,置于室溫平衡30min以上,洗滌液冷藏時可能會有結(jié)晶需恢復(fù)到室溫以充分溶解,每種液體試劑使用前均須搖勻。取出需要數(shù)量的微孔板及框架,將不用的微孔板放入自封袋,保存于2-8℃。
1編號:將樣本和標準品對應(yīng)微孔按序編號,每個樣本和標準品做2孔平行,并記錄標準孔和樣本孔所在的位置。
2加樣反應(yīng):加標準品或樣本50μl/孔到各自的微孔中,然后加酶標記物50μl/孔,再加入50μl/孔的抗體工作液,用蓋板膜封板,輕輕振蕩5秒混勻,25℃反應(yīng)30分鐘。
3洗滌:小心揭開蓋板膜,甩去孔內(nèi)液體,每孔加350ul工作洗滌液,靜置30秒后棄去,重復(fù)洗滌5次,***一次拍干(用吸水紙拍干,拍干后未被***的氣泡可用干凈的***頭刺破)。
4顯色:每孔加入底物液A50μl,再加底物液B50μl,輕輕振蕩5秒混勻,25℃避光顯色15分鐘(若藍色過淺,可適當延長反應(yīng)時間)。
5終止:每孔加入終止液50μl,輕輕振蕩混勻,終止反應(yīng)。
6測吸光值:用酶標儀于450nm處測定每孔吸光度值(建議用雙波長450/630nm)。測定應(yīng)在終止反應(yīng)后10分鐘內(nèi)完成。
黃曲霉素M1檢測試劑盒技術(shù)指標
1試劑盒靈敏度:0.02ppb(ng/ml)
2反應(yīng)模式:25℃,30min~15min
3檢測下限:
谷物……………………………………0.1ppb
飼料……………………………………0.2ppb
4交叉反應(yīng)率:
黃曲霉素B1…………………………100%
黃曲霉素B2…………………………80%
黃曲霉素G1…………………………75%
黃曲霉素G2…………………………45%
黃曲霉素M1…………………………8%
5樣本回收率:
谷物及配合飼料……………………85%±15%
試劑盒組成
酶標板……………………………96孔
標準液(黑蓋):各1ml0ppb、0.02ppb、0.04ppb、0.08ppb、0.16ppb、0.32ppb
高標準液:
100ppb…………………1ml
酶標記物(紅蓋)…………………5.5ml
抗體工作液(藍蓋)………………5.5ml
底物液A(白蓋)……………………6ml
底物液B(黑蓋)……………………6ml
終止液(黃蓋)………………………6ml
20×濃縮洗滌液(白蓋)……………40ml
說明書…………………………………1
份蓋板膜…………………………………1張
自封袋…………………………………1個
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