2.2旋轉圓筒睡眠剝奪法

此方法于 1979 年先應用于睡眠剝奪實驗中，設備主要由一柱形圓筒及一小型慢速馬達構成。圓筒直徑 30 cm，高 30 cm 。圓筒底由 PVC (聚)構成，側壁由直徑為 10.4 m m 的 PVC 桿圍成。桿長度 30 cm，桿之間間隔 15.5 m m，圓筒與小型馬達相連。馬達轉速為每 45 s轉 1 圈(也有學者應用每 m in 轉 1 圈)。至少在實驗前 2 d每天將大鼠放入圓筒中適應環(huán)境 1 次，適應時間不少于 3 h。實驗時將馬達按 45 s每1 圈進行勻速轉動，通過圓筒的轉動帶動大鼠不停運動而達到睡眠剝奪的目的。此類方法簡單易行，睡眠剝奪效果明顯。缺點是長時間不停運動可引起機體的運動后應激反應及身體疲勞，可能干擾睡眠剝奪實驗結果! 此類方法發(fā)展出多種變化，有實驗者在進行新生大鼠睡眠剝奪時將筒旋轉速調節(jié)至 2~3 r/m in后期逐漸增加至 6~7 r/m in。

因 SP 是單只大鼠進行實驗且在實驗中大鼠的活動空間受限，故有學者認為以上的臨床與實驗室表現(xiàn)可能與大鼠的群體隔離或活動空間受限有關，進一步研究發(fā)現(xiàn)，在實驗前群體飼養(yǎng)的動物當與群體隔離后也會出現(xiàn)攻擊行為增加，衢州動物模型，血漿中 CORT 增加，功能抑制等表現(xiàn)。大鼠活動空間受限也可引起血漿中 CORT 的水平的增加，這些結果與單平臺睡眠剝奪實驗中見到的類似，為克服SP 中大鼠與群體分離及活動空間受限的缺點，在 SP 基礎上進一步發(fā)展為多平臺睡眠剝奪法。

1.2多平臺睡眠剝奪法

M P法于1981年先應用在大鼠睡眠剝奪實驗中，在 M P中為擴展大鼠的活動空間將臺由 SP 中的 1 個增加至 7 個，仍將1只大鼠放在臺間進行睡眠剝奪試驗，因大鼠可以在 7個臺間自由活動，故活動范圍較 SP 中有明顯增大。經實驗比較，在M P中反映應激增強的一些指標，動物實驗，如上腺重量增加和胸腺重量減少仍然存在，甚至在大鼠血液中 ACTH %CORT 的增加及上腺重量的增加較SP的更高，提示 M P較SP有更強的應激性!考慮到大鼠為群居動物，單只大鼠實驗易導致與所在群體的隔離。為克服群體隔離所帶來的應激反應，有學者將 M P 法進一步改良發(fā)展為改良多平臺睡眠剝奪法!

注意事項

1. 針頭大小與動物的種類有關，t 同時針頭一定要磨鈍。

2. 檢查灌注泵的運作情況，一定排出管子的氣泡和空氣，防止空氣栓塞。

3. 經腹腔暴腔，先清楚升主動脈外面的脂肪組織和心外膜組織。

4. 將針頭經左心室插入升主動脈（顏色變白的哦），模型動物，并用鉗子固定。

5. 解開右心耳，同時開啟灌注泵。注意，不要隨便揭開心臟的其他部位，否則有時候可能會灌注成功但是絕大部分會造成灌注不成功，尤其。

6. 將 4 度的生理鹽水（好已動物的發(fā)白為標準，我們實驗室的大鼠約用 250ml）和多聚甲醛 (根據所取得材料而定) 依次灌入。

7. 整個過程均應將動物放在冰上，以便于更好地保存目的蛋白和酶的活性。

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