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逆轉(zhuǎn)錄病毒包裝-友名生物公司

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發(fā)布時間:2022-04-08 05:07  






腺病毒是無包膜的線性雙鏈DNA病毒,在自然界分布廣泛,至少存在100種以上的血1清型。其基因組長約36kb,兩端各有一個反向末端重復(fù)區(qū)(ITR),ITR內(nèi)側(cè)為病毒包裝信號?;蚪M上分布著4個早期轉(zhuǎn)錄元(E1、E2、E3、E4)承擔(dān)調(diào)節(jié)功能,以及一個晚期轉(zhuǎn)錄元負責(zé)結(jié)構(gòu)蛋白的編碼。早期基因E2產(chǎn)物是晚期基因表達的反式因子和copy必須因子,早期基因E1A、E1B產(chǎn)物還為E2等早期基因表達所必須。因此,E1區(qū)的缺失可造成病毒在copy階段的流1產(chǎn)。E3為copy非必須區(qū),其缺失則可以大大地擴大插入容量。腺病毒載體大多以5型(Ad5)、2型(Ad2)為基礎(chǔ),新增了55型(Ad55),很多研究機構(gòu)在研究當(dāng)中,55型將比5型流行以及應(yīng)用更具廣泛性。



脂質(zhì)體法

  是用帶正電荷的脂質(zhì)體作載體攜帶外源基因,與帶負電荷的細胞膜融合,把外源基因?qū)爰毎S弥|(zhì)體法轉(zhuǎn)化原生質(zhì)體,其毒性較電1擊法和PEG法小,且適于運輸大分子DNA穿過質(zhì)膜。

  Antonelli等(1990)用該法將基因組DNA轉(zhuǎn)入BMS玉米原生質(zhì)體,獲得轉(zhuǎn)化了的再生愈傷組織,轉(zhuǎn)化率高達8%。

  脂質(zhì)體法的優(yōu)點是轉(zhuǎn)化受體為單個細胞,易于篩選,不易形成嵌合體,對于原生質(zhì)體再生能力好的植物品種,是非常好的轉(zhuǎn)化方法。





20世紀50年代以后,隨著分子遺傳學(xué)的發(fā)展,尤其是沃森和克里克提出DNA雙螺旋結(jié)構(gòu)以后,人們進一步認識了基因的本質(zhì),即基因是具有遺傳效應(yīng)的DNA。研究結(jié)果還表明,每條染色體只含有1~2個DNA分子,每個DNA分子上有多個基因,逆轉(zhuǎn)錄病毒包裝,每個基因含有成百上千個脫氧核苷酸。自從RNA病毒發(fā)現(xiàn)之后,基因的存在方式不僅僅只存在于DNA上,還存在于RNA上。由于不同基因的脫氧核糖核苷酸的排列順序(堿基序列)不同,因此,不同的基因就含有不同的遺傳信息。1994年中科院曾邦哲提出系統(tǒng)遺傳學(xué)概念與原理,探討貓之為貓、虎之為虎的基因邏輯與語言,提出基因之間相互關(guān)系與基因組邏輯結(jié)構(gòu)及其程序化表達的發(fā)生研究。



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