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RNA酶A-武漢友名生物

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發(fā)布時間:2022-04-01 03:07  






當DNA聚合酶 III沿著滯后鏈模板移動時,由特異的引發(fā)酶催化合成的RNA引物即可以由DNA聚合酶 III所延伸,合成DNA。當合成的DNA鏈到達前一次合成的岡崎片段的位置時,滯后鏈模板及剛合成的岡崎片段從DNA聚合酶 III上釋放出來。由于copy叉繼續(xù)向前運動,RNA酶A,便又產生了一段單鏈的滯后鏈模板,它重新環(huán)繞DNA聚合酶 III,通過DNA聚合酶III開始合成新的滯后鏈岡崎片段。通過這種機制,前導鏈的合成不會超過滯后鏈太多,這樣引發(fā)體在DNA鏈上和DNA聚合酶 III以同一速度移動。在copy叉附近,形成了以DNA聚合酶 III二聚體、引發(fā)體和解旋酶構成的類似核糖體大小的以物理方式結合成的復合體,稱為DNA copy體。copy體在DNA前導鏈模板和滯后鏈模板上移動時便合成了連續(xù)的DNA前導鏈,以及由許多岡崎片段組成的滯后鏈。當岡崎片段形成后,DNA聚合酶I通過其 5"→3"外切酶活性切除岡崎片段上的RNA引物,并利用后一個岡崎片段作為引物由 5"→3"合成DNA填補缺口。zui后由DNA連接酶將岡崎片段連接起來,形成完整的DNA滯后鏈。




DNA連接酶的性質

噬菌體T4DNA連接酶分子也是一條多肽鏈,分子量為60Ku,其活性很容易被0.2mol/L的KCl和精胺所抑制。此酶的催化過程需要ATP輔助。T4DNA連接酶可連接DNA-DNA,DNA-RNA,RNA-RNA和雙鏈DNA粘性末端或平頭末端。另外,NH4C1可以提高在大腸桿1菌DNA連接酶的的催化速率,而對T4DNA連接酶則無效。無論是T4DNA連接酶,還是大腸桿1菌DNA連接酶都不能催化兩條游離的DNA鏈相連接。




基因的分子手術是相當復雜的過程,其中zui重要的是連接酶

互補堿基之間的配對,形成雙鏈。并在DNA連接酶的作用下,使同一DNA分子的兩端連接成環(huán)狀,或使兩個分子連成一大的線狀分子。不同限制性內切酶切割DNA產生的三種不同類型的末端。

基因的分子手術是相當復雜的過程,除了需要限制性內切酶外,還需要其他- -些工具酶包括連接酶、DNA 聚合酶、RNA聚合酶、核酸酶、末端修飾酶等,對DNA或RNA進行各種各樣的修飾。其中zui重要的是連接酶。





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