拉曼光譜儀

1. 曾經(jīng)一度懷疑線性CCD壞掉了，勸老板再買一個(gè)，可老板堅(jiān)持說(shuō)不可能的，(沒(méi)可能壞的啦)。事實(shí)證明他是對(duì)的。

2. 將拉曼光譜從顯微鏡光路拆下，倒置固定在光學(xué)平臺(tái)上。

3. 仔細(xì)觀察光路，拆下大部分零件，拆前拍照記下原始位置。Fig. 4

4. 用白膠水粘緊光柵與反射鏡。

5. 拆下兩塊濾光片，用一塊反射鏡反射回去，微調(diào)半透半反鏡并用小孔檢查光路，讓入射光與出射光重合，使反射光透過(guò)pinhole，bruker激光拉曼多少錢(qián)，并且在CCD 鏡頭前看到光柵散射出的長(zhǎng)條光斑。

6. 仔細(xì)調(diào)節(jié)Laser diode 后方的三個(gè)調(diào)整螺絲，同時(shí)微調(diào)Pinhole的位置（上方兩個(gè)機(jī)米螺絲，下方一個(gè)彈性機(jī)米螺絲，前方兩個(gè)緊固螺絲），使透過(guò)Pinhole的光強(qiáng)達(dá)到大且光路共軸垂直。耐心緩慢旋轉(zhuǎn)每一個(gè)旋鈕體會(huì)光斑的強(qiáng)度與移動(dòng)趨勢(shì)。（難的一步）

7. 將外殼從光學(xué)平臺(tái)卸下并封裝好，復(fù)原。倒置接回顯微鏡光路，并仔細(xì)調(diào)兩個(gè)反射鏡的四個(gè)旋鈕，使光斑在屏幕正中央。

8. 安裝后，調(diào)節(jié)顯微鏡的上方鹵燈的明暗，觀察到有信號(hào)強(qiáng)弱的變化，若沒(méi)有，拆掉，重復(fù)上述步驟 2-7。

9. 觀察到明暗，使用標(biāo)準(zhǔn)樣品，用長(zhǎng)積分時(shí)間（20s），觀察到拉曼信號(hào)。Fig.7（a）

10. 使用軟件上的校準(zhǔn)功能(Specify calibration peaks)，用polystyrene樣品重新校準(zhǔn)。

11. 拆下再次做細(xì)微調(diào)整讓信號(hào)強(qiáng)。Fig.7（b）

拉曼光譜在生物學(xué)研究中的應(yīng)用    

拉曼光譜是研究生物大分子的有力手段，由于水的拉曼光譜很弱、譜圖又很簡(jiǎn)單，故拉曼光譜可以在接近自然狀態(tài)、活性狀態(tài)下來(lái)研究生物大分子的結(jié)構(gòu)及其變化。

生物大分子的拉曼光譜可以同時(shí)得到許多寶貴的信息：

（1）蛋白質(zhì)二級(jí)結(jié)構(gòu)：α-螺旋、β-折疊、無(wú)規(guī)卷曲及β-回轉(zhuǎn)

（2）蛋白質(zhì)主鏈構(gòu)像：酰胺Ⅰ、Ⅲ，C-C、C-N伸縮振動(dòng)

（3）蛋白質(zhì)側(cè)鏈構(gòu)像：苯丙氨酸、酪氨酸、色氨酸的側(cè)鏈和后二者的構(gòu)像及存在形式隨其微環(huán)境的變化

（4）對(duì)構(gòu)像變化敏感的羧基、巰基、S-S、C-S構(gòu)像變化

（5）生物膜的脂肪酸碳?xì)滏溞D(zhuǎn)異構(gòu)現(xiàn)象。

（6）DNA分子結(jié)構(gòu)以及和DNA與其他分子間的作用。

（7）研究脂類和生物膜的相互作用、結(jié)構(gòu)、組分等。

（8）對(duì)生物膜中蛋白質(zhì)與脂質(zhì)相互作用提供重要信息。

什么是拉曼光譜儀？

拉曼光譜儀對(duì)于普通人來(lái)說(shuō)還是挺陌生的，bruker激光拉曼結(jié)構(gòu)，一般在科研院所、高等院校物理和化學(xué)實(shí)驗(yàn)室、生物及醫(yī)學(xué)領(lǐng)域等這類地方比較常見(jiàn)，邢臺(tái)bruker激光拉曼，用于光學(xué)方面和研究物質(zhì)成分的判定與確認(rèn)；拉曼光譜儀還可以應(yīng)用于刑偵方面，進(jìn)行的檢測(cè)，還可以應(yīng)用于珠寶行業(yè)，進(jìn)行寶石的鑒定。

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