營養(yǎng)條件

1．培養(yǎng)基細胞培養(yǎng)基包含細胞生長所需的各種營養(yǎng)物質(zhì)，包括碳水化合物、氨基酸、無機鹽、維生素等。針對不同細胞的營養(yǎng)需求，有多種合成培養(yǎng)基可供選擇，如EBSS、Eagle、MEM、RPMll640、DMEM等。

2．其他添加成分在各種合成培養(yǎng)基提供基礎(chǔ)營養(yǎng)物質(zhì)之外，還需根據(jù)不同細胞和不同的培養(yǎng)目的添加其他成分，如血1清、因子等。

血1清提供的是細胞外基質(zhì)、生長因子和轉(zhuǎn)鐵蛋白等重要物質(zhì)，常用的是胎牛血1清。要根據(jù)不同的細胞和不同的研究目的決定添加血1清的比例。10%～20%的血1清能維持細胞較快的生長增殖速度，稱為生長培養(yǎng)液；為維持細胞緩慢生長或不死，添加2%～5%的血1清即可，稱為維持培養(yǎng)液。但血1清中也存在有害于細胞生長和繁殖的物質(zhì)，如補體、免1疫球蛋白和一些生長抑制因子；成分不明確，影響對結(jié)果的分析；不同動物、不同批次的血1清活性差別較大，影響培養(yǎng)效果的穩(wěn)定性。

谷氨酰胺是細胞生長重要的氮源，在細胞生長代謝過程中起重要作用，但由于谷氨酰胺在溶液中很不穩(wěn)定容易降解，4℃下放置7天即可分解約50%，細胞培養(yǎng)，故谷氨酰胺需在使用前添加。

利用細胞培養(yǎng)技術(shù)研究細胞的生命活動規(guī)律，可以很方便地采用各種實驗技術(shù)和方法來觀察、檢測和記錄。例如：通過倒置相差顯微鏡等直接觀察活的細胞；應(yīng)用縮時電影技術(shù)、攝像或者通過閉路電視長時間連續(xù)記錄和觀察被培養(yǎng)細胞的體外生長情況，可以直觀揭示培養(yǎng)細胞的生命活動規(guī)律以及所施加因素的反應(yīng)；利用同位素標記、放1射免1疫等方法檢測細胞內(nèi)的物質(zhì)合成和代謝變化等。

傳統(tǒng)檢測細胞增殖的方法就像照相機，只能拍攝一個瞬間，即檢測某個時間點的細胞增殖，并且無法對各類細胞的增殖做區(qū)分。肝細胞增殖速率較為緩慢，而肝1臟中其他類型的細胞比如巨噬細胞和內(nèi)皮細胞發(fā)生增殖的速率又相對較快。利用傳統(tǒng)方法檢測細胞增殖，在某一時間點內(nèi)能夠獲取的肝細胞增殖信號非常微少甚至沒有，即便有也很容易被其他細胞的增殖信息淹沒。

研究組開發(fā)了一種能夠捕1捉細胞增殖的錄像機——ProTracer，既可以在長時間內(nèi)不間斷地追1蹤細胞增殖，又可以定位，追1蹤某一特定細胞類群（如肝細胞）的細胞增殖，讓黑夜中只有被鎖定目標的“星群”可以發(fā)光，而不是在滿天繁星中找尋其中的一兩顆。

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