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PHENODRIVE凍干粉末的使用方法:
與傳統(tǒng)的培養(yǎng)基質(zhì)膠相比, 我們的合成基質(zhì)膠使用過程極為簡單, 在室溫下即可實現(xiàn)重組使用, 這里就 PHENODRIVE的標(biāo)準(zhǔn)應(yīng)用流程介紹如下:
由于PHENODRIVE 是以無菌凍干粉末狀態(tài)進(jìn)行存儲的, 因此在使用時需要對其進(jìn)行重組。實驗人員可以根據(jù)需求,取適量的粉末將其溶解進(jìn)水、乙醇或培養(yǎng)液中, 這個過程非常簡單, 待其溶解后得到無色、透明液體經(jīng)過濾后即可準(zhǔn)備用于培養(yǎng) , 這一過程即重組。重組后的液體可在-20℃ 的低溫下保存3至少3個月。靜電紡絲技術(shù)的應(yīng)用靜電紡纖維能夠有效調(diào)控纖維的精細(xì)結(jié)構(gòu),結(jié)合低表面能的物質(zhì),可獲得具有超疏水性能的材料,并有望應(yīng)用于船舶的外殼、輸油管道的內(nèi)壁、高層玻璃、汽車玻璃等。
對于這類耗材表面的涂布應(yīng)用, 通常建議將PHENODRIVE 凍干粉末溶解進(jìn)75% 的乙醇中, 按要求的濃度進(jìn)行重組, 將經(jīng)過濾的重組溶液澆鑄在需要涂布的器皿表面,并在無菌的環(huán)境下讓其自然蒸發(fā)(建議紫外線照射的無菌環(huán)境下), 待溶劑蒸發(fā)盡后, 即在器皿表面留下一層透明的薄膜,即完成涂布的過程。其次,作為靜電紡納米纖維全新的研究領(lǐng)域—納米蛛網(wǎng)的研究還在初期階段,納米蛛網(wǎng)的形成過程的理論分析和模型建立尚需深入研究。
建議:在無情況下種植細(xì)胞, 待細(xì)胞粘附后再添加, 比如在細(xì)胞種植3小小時后。
如果采用乙醇溶液進(jìn)行重組, 應(yīng)確保所使用的聚合物支架不溶于乙醇 。按照粉末重組步驟, 然后用移液器移取足夠的重組溶液將支架完全覆蓋, 同樣采用自然蒸發(fā)的方法在支架的表面及空期間形成一層透明的薄膜。
溶解待培養(yǎng)細(xì)胞類型的無組織培養(yǎng)基中的PHENODRIVE, 方法是按照粉末步驟配置適當(dāng)濃度的重組透明重組溶液,再將從組后的溶液與細(xì)胞懸浮液混合, 以達(dá)到0.001% ~1%(V/V)的終 PHENODRIVE 濃度。細(xì)胞懸浮液的典型細(xì)胞濃度是40000個/ml ~1000000個/ml。人的大多數(shù)組織、器在形式和結(jié)構(gòu)上與納米纖維類似,這為納米纖維用于組織和的修復(fù)提供了可能。
使用PHENODRIVE重組液體對常見塑料、玻璃培養(yǎng)耗材表面進(jìn)行涂布:
對于這類耗材表面的涂布應(yīng)用, 通常建議將PHENODRIVE 凍干粉末溶解進(jìn)75% 的乙醇中, 按要求的濃度進(jìn)行重組, 將經(jīng)過濾的重組溶液澆鑄在需要涂布的器皿表面,并在無菌的環(huán)境下讓其自然蒸發(fā)(建議紫外線照射的無菌環(huán)境下), 待溶劑蒸發(fā)盡后, 即在器皿表面留下一層透明的薄膜,基質(zhì)膠怎么除,即完成涂布的過程。靜電紡絲距離5-17厘米,噴絲板的掃描速度0-30毫米/秒,運(yùn)動范圍(噴絲板的位置)0-30厘米。
建議:在無情況下種植細(xì)胞, 待細(xì)胞粘附后再添加, 比如在細(xì)胞種植3小小時后。
PHENODRIVE 作為一款人工合成的、非動物源性的新一代細(xì)胞、組織培養(yǎng)用基質(zhì)膠(基質(zhì)凝膠),與傳統(tǒng)的自動物體提取的基質(zhì)膠相比具有哪些優(yōu)勢呢?這里我們做一個簡單、主要的總結(jié)如下:
傳統(tǒng)基質(zhì)膠
01 基本屬于動物源性的產(chǎn)品;
02 可能含有非預(yù)期的、有害的外來污染物;
03 現(xiàn)有產(chǎn)品使用過程相對比較復(fù)雜;
04 存在生物化學(xué)和地形特征的批次間差異;
05 存儲不穩(wěn)定;
06 產(chǎn)品單一, 無法滿足用戶的需求;
07 重組層粘連蛋白和纖連蛋白僅適用于某些類型的細(xì)胞, 不穩(wěn)定且昂貴;
08 部分產(chǎn)品只能在低溫條件下溶解,且較佳培養(yǎng)時間較短;
09 聚鳥氨酸通常與層粘連蛋白結(jié)合使用,主要限于神經(jīng)元細(xì)胞;
合成基質(zhì)膠
01 合成的非動物源性的產(chǎn)品;
02 所有化學(xué)成分均可控;
03 使用非常方便, 水、乙醇、培養(yǎng)液等均可以溶解;
04 人工合成, 化學(xué)成分穩(wěn)定, 批次間一致性較好;
05 性能穩(wěn)定, 低溫可存儲至少12個月,紫外線照射不影響;
06 產(chǎn)品范圍較廣, 可滿足幾乎所有已知細(xì)胞系應(yīng)用需求;
07 可用于無培養(yǎng);
08 適用于 2D 表面培養(yǎng)耗材、微孔支架以及直接加入培養(yǎng)液;
09 能夠模仿大多數(shù)組織的細(xì)胞外基質(zhì)或上皮和內(nèi)皮基底膜的網(wǎng)狀結(jié)構(gòu);
10 能夠以高度受控的方式向細(xì)胞展示生物配體,無論是在間距還是密度方面;
11 能夠以受控和可的方式培養(yǎng)細(xì)胞并保留其表型而無需更改實驗方案;
12 與現(xiàn)有的顯微鏡、成像技術(shù)以及常規(guī)的染色等應(yīng)用方案兼容;
13 在旋轉(zhuǎn)條件下懸浮形成3D細(xì)胞結(jié)構(gòu), 或與其他生物材料結(jié)合用于3D打印;
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