細胞凍存的操作步驟

1. 配制含10%DMSO或甘油、10～20%小牛血的凍存培養(yǎng)液；

2. 取對數(shù)生長期的細胞，去除舊培養(yǎng)液，用PBS清洗。

3. 去除PBS，CS250凍存袋報價，加入適量胰蛋白酶（覆蓋培養(yǎng)皿表面）把單層生長的細胞消化下來；

4. 離心1000rpm，5min；

5. 去除胰蛋白酶，加入適量配制好的凍存培養(yǎng)液，用吸管輕輕吹打使細胞均勻，計數(shù)，調節(jié)凍存液中細胞的密度為5×106/ml～1×107/ml；

6. 將細胞分裝入凍存管中，每管1～1.5 ml；

7. 在凍存管上標明細胞的名稱，凍存時間及操作者；

8. 凍存：標準的凍存程序為降溫速率-1～-2℃/ min；當溫度達-25℃以下時，可增至-5℃～-10℃/min；到-100℃時，則可迅速浸入液氮中。也可將裝有細胞的凍存管放入-20℃冰箱2h ，CS50凍存袋報價，然后放入-70℃冰箱中過夜，取出凍存管，移入液氮容器內。

凍存袋的作用

適度地保存一定量的細胞，可以防止因正在培養(yǎng)的細胞被污染或其他意外事件而使細胞丟種，起到了細胞保種的作用。除此之外，還可以利用細胞凍存的形式來購買、寄贈、交換和運送某些細胞。 細胞凍存時向培養(yǎng)基中加入保護劑--終濃度5%．15%的甘油或二亞砜(DMSO)，可使溶液冰點降低，加之在緩慢凍結條件下，細胞內水分透出，減少了冰晶形成，從而避免細胞損傷。

動物細胞凍存組織

1. 首先準備好用于包裝樣本的鋁箔或冷凍保存管，并且用油性記號筆在鋁箔或凍存管外表多處寫明樣本編號。

2. 準確切除所需組織后，凍存袋報價，立即剔除結締組織和脂肪組織等非研究所需的組織類型。

3. 在RNase-free 的生理鹽水中迅速漂洗樣本，以去除血漬和污物。

4. 用準備好的鋁箔或冷凍保存管裝載包裹組織，迅速投入液氮冷卻。

5. 填寫樣本登記單，寫明樣本名稱、組織類型、編號、取樣日期、樣本處理過程等情況。

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