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廣州碩譜生物科技有限公司,反相SPE柱,是目前國內生產SPE小柱較好的生產廠家。Diol固相萃取柱
一般來說,Diol固相萃取柱批發(fā),我們需要分離的混合物的性質各不相同,很難通過調整 PH來達到要求。一般而言,在改變流動相 PH的基礎上,又加入緩沖鹽以改變組分的選擇性和分離程度。大多數(shù)C18反相分離柱在使用
一、強酸淋洗、強堿
用硅膠作載體的粘結相填料,其使用要求是:流動相 PH值在2.5-7.5之間。在 PH<2時,流動相可能與載體硅膠和合相發(fā)生水解反應,從而導致碳鏈損失;在 PH<7時,流動相可能使載體硅膠溶解。因此,硅膠基體C18 (即 ODS)在強堿條件下基本壽命較短,聚合體C18雖然能在高堿性條件下穩(wěn)定工作,但其價格昂貴,分離性能及模組強度均不如 ODS。
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改進凈化方式
在一般情況下,目標化合物模式比雜質模式的凈化效果要好,如果要分析的是某種特定種類的化合物,則較好是用保留目標化合物的模式來分析;舉一個簡單的例子,也就是對蔬菜中的多菌靈和塞菌靈(一類堿性農1藥)進行分析,用陽離子交換柱可專一性地保留這些農1藥,使其與干擾物基本完全分離,而用正相吸附劑或石墨化炭黑進行保留干擾物的操作只能去除主要的干擾物,保留干擾物的數(shù)量較多。
此外,如果可以用多個 SPE柱對目標化合物進行凈化,應選擇選擇性好的吸附劑;選擇性越高,離子交換>正相>反相。
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聚乙烯醇小柱活化平衡的目的有二,一是使官能團填料的粘附性和伸縮性保持對目標化合物的大吸附活性,另一種目的是去除填料本身可能引入的雜質。硅膠鍵合C18,是一種在硅膠微球表面粘結的疏水性C18官能團,為使其對目標物保持充分吸附活性,需要在濕潤環(huán)境上樣物在填料表層形成的液膜(活化平衡)與上樣物的溶劑分子具有良好的相容性,目標物在膜間進行傳質,與膠接C18發(fā)生疏水作用時,目標物與膠接C18本身并不具有水浸潤性,直接上樣物,C18蜷縮,而較強的疏水性則使其難以與目標物中的目標物分子充分接觸,因此, HLB小柱采用聚合物改性材料,增加了親水基團,使其在上樣物的環(huán)境中與目標物分子充分接觸,而發(fā)生傳質,使目標物在上樣物的環(huán)境中完全保留。
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反相萃取通常用于化合物的預處理,正如反相色譜是色譜中常用的分離方法一樣,反相萃取中的淋洗液通常是一種水相或含水的緩沖溶液,除去水分后,可方便地進行干燥、濃縮。
有些項目,白山Diol固相萃取柱,在淋洗步驟完成后,直接用一定量的洗脫液,如1 ml洗脫,這個過程中洗脫和定容集是一步處理,前一步處理必然會影響洗脫步驟的定量結果。
也就是溶劑互溶問題,當淋洗過程中使用的溶劑極性與洗脫溶劑極性的差別較大時,就會產化分層,洗脫阻力大,洗脫液容易被稀釋等問題,造成洗脫效果不同,從而導致試驗結果。
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反相模式下,Diol固相萃取柱分類,溶劑體系的極性應以樣品溶劑、淋洗溶劑、洗脫溶劑的次序遞減,并以遞增程度遞減。要確保所選擇的樣本溶劑不會洗脫目標物,所選擇的淋洗劑應在不洗脫目標物的前提下,很大限1度地洗脫干擾物,所選洗脫劑應能碰巧完全洗脫目標物。
正相位模式是 SPE小柱相的固定相極性大于流動相極性的分離模式。主要用途:
固相萃取材料極性表面與物極性官能團極性相互作用;極性力比非極性力強,但比離子力弱;常用的極性基團有羥基,胺基,巰基等。弱極化基質環(huán)境有利于形成極性力,因為弱極化溶劑不能與極性固定相形成氫鍵功能團。結果表明: SPE正相萃取后,樣品基質多為弱極性,如正己烷、二1氯甲1烷、菜油等,而目標物多含有極性官能團。
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渠道效應
當 SPE小柱填料裝實后,流速過小柱時,液體是以層流通過填料層,Diol固相萃取柱品牌,將填料層充分浸潤,潤濕的液面截層向上推進,見附圖;流速過大時,柱床厚度過大,可能在填料內形成溝道,液流將穿過溝道,快速通過小柱,而使填料浸潤不足,從而使得體與填料的接觸面積大大減少,嚴重影響填料對目標物質的保留性。
溶液環(huán)境的 pH如何影響化合物在柱狀物上的保持性,我們?yōu)槭裁匆P注該化合物的 pKa值,這些因素需要放在C18柱狀物上嗎?
A:首先, Ka指酸度系數(shù),也稱為酸離解常數(shù),可以被理解為酸離解H離子的能力,而 pKa=- lgKa,對于酸,在環(huán)境中 pH離子的平衡如下
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