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移動(dòng)相中受熱,或流動(dòng)相不同組分混合將產(chǎn)生氣體,氣泡進(jìn)入泵內(nèi)造成壓力波動(dòng),色譜圖上出現(xiàn)毛刺。可以試用以下方法來(lái)解決問(wèn)題:流動(dòng)相再脫氣;采用更有效的脫氣方法或兩者配合使用;改系統(tǒng)外混合前進(jìn)行混合。HPLC使用的流動(dòng)相必須預(yù)先除氣,否則很容易在系統(tǒng)中漏氣,影響泵的工作。在體系中產(chǎn)生氣泡:流動(dòng)相本身存在,梯度淋洗混合后會(huì)放出氣泡;氣泡的影響:存在于管道中,系統(tǒng)壓力不穩(wěn)定,實(shí)驗(yàn)結(jié)果偏離;存在于單向閥中,容易導(dǎo)致液體回流,流量不準(zhǔn)確,甚至不吸液存在于檢測(cè)器中,對(duì)檢測(cè)器產(chǎn)生影響。因此對(duì)液相相對(duì)流動(dòng)相的氣泡和雜質(zhì)要求比較嚴(yán)格。汽泡對(duì)柱子的分離效率有影響,檢測(cè)器的靈敏度、基線穩(wěn)定性甚至不能檢測(cè)。(噪音增加、基線不穩(wěn)定、突然跳動(dòng))。
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另外,20mm透明鉗口平底頂空瓶廠家批發(fā),溶解在流動(dòng)相中的氧也可以與樣品、流體相甚至固定相(如胺)反應(yīng)。溶氣還會(huì)引起溶劑 pH值的變化,給分離和分析結(jié)果帶來(lái)誤差。溶氧能與某些溶劑(例如,、四氫)形成紫外吸收絡(luò)合物,這種配合物能夠改善背景吸收(尤其是低于260 nm),并導(dǎo)致探測(cè)靈敏度的輕微下降,但更重要的是,會(huì)造成基線漂移或形成鬼峰(假峰)。熒光檢測(cè)中,在一定條件下,溶解氧也會(huì)引起溶解氧,尤其是芳香烴、脂肪醛、酮等。有時(shí),熒光反應(yīng)可降至95%以上。電化學(xué)檢測(cè)(尤其是還原電化學(xué)法)對(duì)氧的影響較大。去除流動(dòng)相中的溶解氧,20mm透明鉗口圓底頂空瓶廠家批發(fā),將大大提高紫外檢測(cè)器的性能,并提高某些熒光檢測(cè)應(yīng)用中的靈敏度。常見(jiàn)的脫氣方法有:加熱煮沸、抽真空、超聲波、吹氦等。對(duì)于混合溶劑,采用抽氣或煮沸的方法,需考慮因溶劑揮發(fā)較低而引起的成分變化。
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一般情況下,梅州頂空瓶廠家批發(fā),更換活塞密封墊后,應(yīng)按照密封墊安裝的步驟進(jìn)行磨合,但不能用在正相密封墊上?!町?dāng)泵頭安裝有柱塞清洗附件時(shí),由于該附件中還設(shè)有密封墊,因此活塞桿運(yùn)動(dòng)時(shí)的阻力將增大。因此在開(kāi)泵之前,一定要用10%的異,并把它的流速調(diào)到大約2-3滴/分鐘,使溶液流過(guò)沖洗裝置。(對(duì) SL泵來(lái)說(shuō),如果不用鹽溶液即可)10%異可以幫助降低水的表面張力,具有抑制細(xì)菌的作用。請(qǐng)勿使用其他溶劑。如果泵頭沒(méi)有打開(kāi)10%異,安裝沖洗附件,就會(huì)縮短密封墊和活塞桿的壽命(除二元泵 SL外),泵頭如果發(fā)出“吱吱”聲不影響使用和泵的精度,可改變壓縮因子(compressibility)。
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自動(dòng)進(jìn)樣器樣本必須在進(jìn)樣前進(jìn)行適當(dāng)?shù)念A(yù)處理,要經(jīng)過(guò)亞微米級(jí)濾膜的過(guò)濾或離心,以防止樣品中的微小顆粒堵塞管道,好是用流動(dòng)相作為配制樣品的溶劑,該溶劑對(duì)樣品應(yīng)具有良好的溶解性能。當(dāng)喇叭口朝上暴露在空氣中時(shí),有時(shí)空氣中較大的塵埃顆粒碰巧落在針座的流道內(nèi),導(dǎo)致針座堵塞。此時(shí)可試著將針座卸下來(lái),把它接在泵出口上反沖,一般可以解決問(wèn)題。如緩沖液頻繁使用, ALS計(jì)量泵除泵頭外的柱塞和密封圈,20mm透明鉗口平底頂空瓶廠家批發(fā),應(yīng)定期清洗六通閥的轉(zhuǎn)子密封圈和定子密封圈,防止有鹽粒子磨損 ALS必須使用 Agilent的樣品瓶及瓶蓋;使用不兼容的或加工精度差的樣品瓶及瓶蓋,會(huì)導(dǎo)致 ALS故障率上升,并降低產(chǎn)品性能。
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無(wú)過(guò)濾相的流動(dòng)…由于柱塞、密封環(huán)、氣缸體和單向閥等雜質(zhì)顆粒都會(huì)磨損,因此,應(yīng)該在流動(dòng)相中預(yù)先除去任何固體顆粒。好的流動(dòng)相是在玻璃容器中蒸餾,而通常的過(guò)濾方法是濾過(guò),可以使用 Millipore濾膜(0.2μ m或0.45μ m)等過(guò)濾器。泵入口處應(yīng)接砂濾棒(或片)。應(yīng)該經(jīng)常清洗或更換輸液泵的濾器。泵用后不能及時(shí)清洗移動(dòng)相中不得含有腐蝕性物質(zhì),含有緩沖液的流動(dòng)相不能留在泵中,特別是當(dāng)泵停泵過(guò)夜或更久時(shí)。若含有緩沖液的流動(dòng)相留在泵中,可能會(huì)析出鹽的微晶,如上述固體顆粒那樣損壞密封環(huán)和柱塞,甚至只是因?yàn)槿芤禾幱陟o止?fàn)顟B(tài)時(shí),會(huì)析出。所以,必須用純水將泵完全清洗干凈,然后換成適合于保存色譜柱和有利于泵維護(hù)的溶劑(對(duì)于反相鍵合硅膠固定相,可能是或-水)。
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可流動(dòng)相消失…水泵工作時(shí)要注意防止溶劑瓶?jī)?nèi)的流動(dòng)相被用完,否則泵運(yùn)轉(zhuǎn)也會(huì)磨損柱塞、氣缸或密封環(huán),終造成泄漏。如果沒(méi)有流動(dòng)相的外流,沒(méi)有壓力指示怎么辦?也許是泵內(nèi)有大量的氣體,此時(shí)可開(kāi)啟泄壓閥,使泵在較大流量(如5 ml/min)下運(yùn)轉(zhuǎn),排出氣泡,也可用一個(gè)50ml的針筒在泵出口協(xié)助抽氣。另外一個(gè)可能的原因是密封環(huán)磨損需要更換。
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