等溫核酸試劑盒分類

目前新的等溫擴增檢測技術(shù)。以此為基礎(chǔ)的TwistAmp? 核酸擴增產(chǎn)品，能夠在15分鐘內(nèi)進行常溫下的單分子核酸檢測。該技術(shù)對硬件設(shè)備的要求很低，特別適合用于體外診斷、獸醫(yī)、食品安全、生物防御和農(nóng)業(yè)等領(lǐng)域。常規(guī)PCR必須經(jīng)過變性、退火、延伸三個步驟，等溫核酸試劑盒，而PCR儀本質(zhì)上就是一個控制溫度升降的設(shè)備。RPA反應(yīng)的適宜溫度在37°C - 42°C之間，無需變性，在常溫下即可進行。這無疑能大大加快PCR的速度。

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“一般來說，核酸檢測是目前準確的診斷方法?！庇腥烁嬖V記者，核酸檢測試劑盒出現(xiàn)假陰性，即沒有發(fā)現(xiàn)隱藏的病毒，可能與兩個方面有關(guān)。一是樣品沒有采集到。這一點很容易理解。例如，咽拭子采樣時人比較難受，深度不夠可能會采集不到含有病毒的樣本。但這樣的情況應(yīng)該很少發(fā)生。

另一個假陰性的原因是核酸檢測試劑盒的探針和引物質(zhì)量有波動，特別是定量的不造成檢測的不準確。換句話說，由于這一次各家核酸檢測試劑盒供應(yīng)商都是臨時啟動，等溫核酸試劑盒代理，有些準備不足，或是執(zhí)行規(guī)定步驟不到位，導(dǎo)致在生產(chǎn)過程中不進行定位，或是酶活性不足，等溫核酸試劑盒總代理，或是酶中含有抑制酶鏈反應(yīng)的重金屬離子等，等溫核酸試劑盒報價，都可能造成檢測結(jié)果出現(xiàn)假陰性。

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如何提高擴增曲線的可重復(fù)性?

優(yōu)化擴增曲線考慮以下因素: 對于低拷貝數(shù)模板，不穩(wěn)定擴增可能是因為達到檢測限或者是反應(yīng)混勻程度不同（未混勻的反應(yīng)擴增效率不佳）。另外，在低溫情況下存貯，重組酶和輔助蛋白在50%甘油情況下形成沉淀，也是可能導(dǎo)致不穩(wěn)定擴增的原因。所以，20x反應(yīng)mix在室溫下解凍并震蕩渦旋將使其成為液體，不影響其功能，并且有效提高擴增效率。不穩(wěn)定擴增也可能是因為master mix量不足，在加入體系前，用戶必須保證震蕩后20x反應(yīng)組分均一。

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